A pulzáló follikulusstimuláló hormon (FSH) szekréciója a pubertás kor előtti nőstény juhokban táplálékkorlátozással és anélkül

S. E. RECABARREN, Biol., M.Sc. A. LOBOS, M. V., Mg.S. O. POBLETE, M. V.; P. MUÑOZ, J. PARILO, Ing. Agr. Állatorvosi Kar Állatfiziológiai és Endokrinológiai Laboratórium,
Concepcióni Egyetem, Campus Chillán

* A FONDECYT 1990389 projekt finanszírozta.

ÖSSZEFOGLALÁS

Kulcsszavak: FSH, juh, pubertás, táplálékkorlátozás.

Kulcsszavak: FSH, bárányok, pubertás, táplálékkorlátozás.

BEVEZETÉS

Jelen munka célja az volt, hogy felismerje az FSH diurnális pulzáló szekréciójának jellemzőit 6-10 hétig korlátozott táplálkozású prepubertális anyajuhokban, és összehasonlítsa őket az anyajuhok azonos korú táplálékkorlátozás nélküli szekréciójával.

ANYAG ÉS MÓDSZEREK

FSH pulzilitási vizsgálat. Az FSH pulzilitási vizsgálata vérminták (3 ml) összegyűjtéséből állt az előzőleg beültetett jugularis katéteren keresztül, 10 perces időközönként, 5 órán át (10: 00-15: 00 óra) 20, 26 és 30 héten keresztül. életkorától kezdve, a kísérleti csoport 0,6 és 10 hetes táplálékkorlátozása után. A vérmintákat heparinizált csövekbe helyeztük (10 NE heparin/ml vér), majd 1000 x g-vel 15 percig centrifugáltuk, a plazmát elválasztottuk és 20 ° C-on fagyasztottuk le, amíg a plazma FSH-koncentrációit később elemeztük. radioimmunoassay (RIA) által.

FSH radioimmunassay. Az FSH radioimmun vizsgálatot az NIADDK (USA) anyagával végeztük, az anyagokkal feltüntetett protokoll szerint. Röviden: 200 µl standard juh-FSH-t (oFSHRP) 0,02–25,6 ng/cső tartományban vagy 200 µl ismeretlen mintát inkubáltunk 100 µl jódozott FSH-val (oFSH I-1 AFP 5679 C) és 100 µl antiszérummal. juh juh FSH ellen (AFP C 5228113) 24 órán át szobahőmérsékleten. Ezután 100 ul második antitestet adunk hozzá, és az inkubálást 48 órán át folytatjuk. Ezt követően a csöveket 1000 x g-vel 40 percig 4 ° C-on centrifugáltuk, a felülúszót eldobtuk, és a pelletet LKB gamma-spektrométerrel meghatároztuk. A kontrollpuffer 90% -ának megfelelő minimális kimutatható koncentráció 0,2 ng/ml volt, a vizsgálaton belüli variációs koefficiens 6% és az inter-assay 10% volt.

A pulzáló FSH szekréció jellemzőinek meghatározása. Az egyes juhok plazma FSH-koncentrációit külön-külön elemeztük a Veldhuis és Johnson (1986) által kifejlesztett CLUSTER számítógépes programmal. Ez a program ismétlődő algoritmus segítségével lehetővé teszi az egymást követő mintasorozatban impulzusként definiált hormonális ingadozások azonosítását az RIA variációs együtthatójának, a mintavételi frekvenciának, az operátor által kijelölt impulzus meghatározott formájának felhasználásával ( 1 vagy több pontot használva a csúcshoz és egy vagy több pontot a legalacsonyabb értékhez), és a pontok közötti statisztikai különbségeket. A program meghatározza az impulzusok átlagos amplitúdóját, az impulzusok közötti intervallumot, az impulzusok időtartamát és a legalacsonyabb értéket (az impulzusok közötti plazmakoncentrációk átlaga). Az FSH impulzusok azonosításához 3x3 impulzus alakot választottunk a maximum és a minimum meghatározásához, 2,75-ös t teszttel (Veldhuis és Johnson, 1986). Ezzel az eljárással a hamis pozitív impulzus azonosításának valószínűsége kevesebb mint 5% volt.

Statisztikai elemzés. Az FSH pulzáló szekréciójának paraméterei: az időszak keresztmetszeti átlaga (ng/ml/5 óra), impulzus frekvencia (impulzusok száma/5 óra), az impulzusok amplitúdója (ng/ml) és a legalacsonyabb érték (ng/ml) A 20., 26. és 30. héten jelen lévő elemzéseket ugyanabban a csoportban elemeztük blokktervezésű ismételt minták varianciaanalízisével, összehasonlítva a GB.Stat v.6 statisztikai programot használó Newman Keuls teszttel mért átlagokat. Az adatok átlag ± standard hiba formájában vannak feltüntetve. A P 0,05 értéket vettük figyelembe. Másrészről az élelmiszer-korlátozás alá eső anyajuhok esetében tendencia volt megfigyelhető a 20 és 30 hetes kor közötti csökkenésre, 10 hetes korlátozás után. Az FSH átlagos plazmakoncentrációja (ng/ml/5 óra) a kísérleti anyajuh csoportban több mint 50% -kal volt alacsonyabb, mint a kontroll anyajuhok FSH plazmakoncentrációja (P> 0,05).

Amint az 1. táblázat mutatja, az FSH impulzusok gyakorisága nem mutatott statisztikai különbségeket az azonos csoportba tartozó korok vagy a csoportok között. Az FSH impulzusok amplitúdója a kontrollcsoportban 20-30 hetes kor között nőtt, több mint 50% -kal csökkent a 20-30 hetes kor közötti korlátozott táplálkozású anyajuhoknál (P> 0,05). Az impulzusok amplitúdója alacsonyabb volt az élelmiszer-korlátozással rendelkező anyajuhokban, mint a kontrollcsoportban 30 hetes korban (P = 0,079), 10 hét étkezési korlátozás után.

A legalacsonyabb érték 50% -kal csökkent 10 hetes táplálékkorlátozás után az anyajuhoknál, korlátozás nélkül, de az életkor vagy a két anyajuhcsoport között statisztikai szignifikancia nélkül.

Ami az anyajuhok FSH plazmakoncentrációjának profilját illeti, a kontroll anyajuhokban, 30 hetes korban, egy anyajuh kivételével, megfigyelték, hogy az FSH pulzáló szekréciója hangsúlyosabbá vált a 20 és 26 hetes életkor (1. ábra). Éppen ellenkezőleg, a korlátozottan táplált anyajuhoknál az FSH szekréciójának pulzilitása csökken az azonos korú kontroll anyajuhokhoz képest (2. ábra).

nappali

VITA

Azt feltételezték, hogy az élelmiszer-korlátozás késlelteti az anyajuhok pubertásának kezdetét, ami az alacsonyabb GHRH-szekréciónak köszönhető, amely kevesebb LH-szekrécióval társul. A vizsgálat célja annak felismerése volt, hogy az étrendi korlátozás befolyásolhatja-e az FSH szekrécióját, szem előtt tartva, hogy az FSH és az LH is kiválasztódik az agyalapi mirigyből a GnRH hatására.

Összefoglalva, a plazma FSH koncentrációja 20-30 hetes kor között nem növekszik szignifikánsan a normál táplálkozási renddel rendelkező anyajuhoknál, míg az élelmezéskorlátozott anyajuhoknál az FSH csökken. Az eredmények arra engednek következtetni, hogy az élelmiszer-korlátozásnak részleges elnyomó hatása lenne az FSH-szekrécióra, oly módon, hogy az élelmiszer-korlátozással rendelkező anyajuhokban az ösztrikus ciklusok megkezdésének késése más mechanizmusok következménye lenne, amelyekben az FSH-szekréció nem sérülne. Az FSH, vagy ha lenne, az FSH nem lenne meghatározó tényező ebben a jelenségben.

ABSZTRAKT

KÖSZÖNÖM

A szerzők köszönetet mondanak az NIADDK-nak és Dr. A. Parlow-nak az FSH RIA reagensek iránti bőséges ellátásáért. Dr. José Cox-nak, hogy ellátta velünk a kísérleti szobát.

HIVATKOZÁSOK

BOUKHLIQ, R., N. R. ADAMS, G. B. MARTIN. 1996. A táplálkozás hatása az anyajuhok petefészek- és hipofízishormonjainak egyensúlyára. Anim. Játék Sci. 45: 59-70. [Linkek]

CAMERON, J. L., T. E. WELTZIN, C. MC CONAHA, D. L. HELMREICH, W. H. KAYE. 1991. A pulzáló luteinizáló hormon szekréciójának lassulása férfiaknál negyvennyolc óra koplalás után. J. Clin. Endokrinol. Metab. 73, 35-41. [Linkek]

Én? ANSON, H., E. H. QUINT, R. I. WOOD, B.C. ANGOL, D. L. FOSTER. 1994. Mellékvese tengely és hipogonadotropizmus a növekedésben korlátozott nőstény bárányban. Biol. Reprod. 50: 137-143. [Linkek]

I. ANSON, H., J. M. MANNING, C. G. HERBOSA, PELT J., C. R. FRIEDMAN, R. I. WOOD, D. C. BUCHOLTZ, D. L. FOSTER. 2000. A gonadotropin-felszabadító hormon szekréciójának központi gátlása a növekedéskorlátozott hipogonadotrop nőstény juhokban. Endocrinology 141: 520-527. [Linkek]

KALRA, S. P., P. S. KALRA, 1996. Táplálkozási meddőség: Az összekapcsolt hipotalamusz neuropeptid Y-galanin-opioid hálózat szerepe. Elülső. Neuroendocrinol. 17, 371-401. [Linkek]

PADMANABHAN, V., C. D. MIEHER, M. BORONDY, H. I? ANSON, R. I. WOOD, T. D. LANDEFELD, D. L. FOSTER, I. Z. BEITINS. 1992. A keringő bioaktív folliclestimuláló hormon és a kevésbé savas folliclestimulation hormon izoformák megnőnek a pubertás kísérleti indukciója során a nőstény bárányokban. Endokrinológia 131: 213-220. [Linkek]

POLKOWSKA J, Y. LERRANT, M. WANKOWSKA, A. WOJCIK-GLADYSZ, A. STARZEC, R. COUNIS. 2003. Az étrendi fehérje korlátozásának hatása az LH és az FSH szekréciójára pubertás előtti nőstény bárányokban. Anim. Játék Sci. 76: 53-66. [Linkek]

RECABARREN, S. E., A. URRUCELQUI, M. ROBBIANO, A. LOBOS, P. ORELLANA, J. PARILO. 1995. Az L-arginin és az L-ornitin intravénás infúziójának hatása a növekedési hormon szekréciójára prepubertális juhokban. Arch. Med. Vet. 28: 99-103. [Linkek]

RECABARREN, S. E., A. LOBOS, E., ABALOS C. ARRIAGADA. 1999. A naloxon infúziók hatása az éhomi juh bárányok pulzáló LH szekréciójára, inzulin és kortizol plazmakoncentrációira. Exp. Clin. Endokrinol. 107-es cukorbetegség (1. kiegészítés): S49. Absztrakt P-12. [Linkek]

RECABARREN, S. E., A. LOBOS, V. TORRES, R. OYARZO. 2001. A táplálékkorlátozás hatása a juhok bárányainak leptin és luteinizáló hormon szekréciójára. Az Endokrin Társaság 83. éves ülése, Denver, Co. USA. Absztrakt P3-312. [Linkek]

SCHREIHOFER, D. A., D. B. PARFITT, J. L. CAMERON. 1993. A luteinizáló hormon szekréciójának elnyomása rövid távú éhgyomorra hím rhesus majomban: a metabolikus versus stressz jelek szerepe. Endocrinology 132: 1881-1889. [Linkek]

STEINER, R. A., J. L. CAMERON, T. H. MCNEILL, D. K. CLIFTON, W. J. BREMMER. 1983. Metabolikus jelek a pubertás kezdetéhez. In: A reprodukció neuroendokrin aspektusai. Ed: RL Norman, 183–228, Academic Press, NY. [Linkek]

TJONDRONEGORO, S., G. B. MARTIN, S. R. SUTHERLAND, R. BOUKHLIQ. 1996. A táplálkozás, a tesztoszteron és az inhibin kölcsönhatásai a gonadotropin szekréciójának szabályozásában érett kosokban. Játék Termékeny. Dev. 8: 855-862. [Linkek]

VELDHUIS, J. D., M. L. JOHNSON. 1986. Klaszterelemzés: egyszerű, sokoldalú és robusztus algoritmus az endokrin impulzus detektálására. Am. J. Physiol. 250: E468-E493. [Linkek]

VIZCARRA, J. A., R. P. WETTEMANN, T. D. BRADEN, A. M. TURZILLO, T. M. NETT. 1997. A gonadotropin-felszabadító hormon (GnRH) pulzusfrekvenciájának hatása a tehén gonadotropin alegységeinek luteinizáló hormon és follikulus-stimuláló hormon, GnRH receptorok és messenger ribonukleinsav szérum- és hipofízis-koncentrációira. Endocrinology 138: 594-601. [Linkek]

WADE, G. H., J. E. SCHNEIDER, H-Y. LI. 1996. A termékenység szabályozása metabolikus jelzésekkel. Am J Physiol. 270: E1-E19. [Linkek]

WELT, C. K. 2002. Az inhibin, aktivin és follisztatin fiziológiája és patofiziológiája a női reprodukcióban. Curr. Opin. Obstet. Gynecol. 14, 317-323. [Linkek]

WILDT, L., A. HÄUSLER, G. MARSHALL, J. S. HUTCHISON, T. M. PLANT, P. E. BELCHETZ, E. KNOBIL. 1981. A gonadotropint felszabadító hormon stimuláció és a gonadotropin szekréció gyakorisága és amplitúdója a rhesus majomban. Endocrinology 109: 376-385. [Linkek]

A magazin teljes tartalma, kivéve, ha azonosítják, a Creative Commons Licenc alatt van