A proteolitikus enzimek és a szexuális
absztinencia a -glükozidáz szinteken
az emberi szemináris plazmában
Patricio Peña S 1,2, Raúl Sánchez G, Belgium Vásquez P 1,3,
Claudia Castillo K 1, Werner Miska 4
2000. december 18-án kapott. Javított változatban 2001. január 16-án elfogadva.
Finanszírozási forrás: MECE-SUP FRO-98 Program, Projekt: "A
Regionális tudományos, technológiai és termelési kapacitás. "Kutatási Igazgatóság
(9735-9820), Universidad de La Frontera Temuco és DFG-GTZ-93.2157.106.100.
Alaptudományok Tanszék, Preklinikai Tudományok Tanszék és Reprodukciós Biotechnológiai Központ, Orvostudományi Kar, Universidad de La Frontera, Temuco, Chile.
Andrológiai Tanszék, J-L-Universität Giessen, Németország.
1 orvostechnológus, 2 MCS, 3 tudományos fokozat
Ezt a vizsgálatot a következő célkitűzésekkel terveztük: 1) a normál donorok szeminális plazmájában jelen lévő α-glükozidáz referenciaértékeinek megszerzésére. 2) normál donorok spermamintáiban meghatározzuk az a-kimotripszin proteolitikus enzim hozzáadásának az a-glükozidáz aktivitására gyakorolt hatását; és 3) a nemi absztinencia időtartamának az α-glükozidáz aktivitására gyakorolt lehetséges hatásának értékelése a spermium krioprezervációs programból származó betegek soros mintáiban.
ANYAG ÉS MÓDSZER
Az Orvostudományi Kar Etikai Bizottságának konzultációja és jóváhagyása után, tájékozott beleegyezés útján, donorokat választottak ki ebbe a tanulmányba egyetemünk hallgatói és az Andrológiai Poliklinikára látogató betegek között, kizárva ebből a korábbi betegségekkel és szexuális úton terjedő alanyokat. Az α-glükozidáz értékelését rutinszerűen határozták meg a spermium krioprezerválását igénylő betegek szeminális plazmájában.
Az α-kimotripszin hatása az α-glükozidáz aktivitásra. Az a-kimotripszin 18 növekvő koncentrációit (0,1-től 10 mg/ml-ig) adtuk normál donorok (n = 6) spermiummintáihoz, amelyeket -20 ° C-on tartottak a vizsgálatig. Ezt követően az α-glükozidáz aktivitását számszerűsítettük. Az egyes donorok alapértékét korábban meghatároztuk, és 100% -nak tekintettük, hogy összehasonlítsuk azokat a mintákat kapott értékekkel, amelyekhez -chymotrypsint adtunk.
Az α-glükozidáz monitorozása sorozatban nyert szeminális plazmamintákban. Sorozatmintákat 9 páciensről gyűjtöttünk az UFRO Andrológiai Laboratórium spermium krioprezervációs programján keresztül. A mintákat három csoportba soroltuk: az 1. sz. A 2 napos absztinencia, a 2. – 4. És a 3. – 6. Napok kezdettől fogva megfelel, de mindegyiket egymás után vettük, oly módon, hogy közöttük, az absztinencia mindig 2 napnak felelt meg. A szemináris plazma feldolgozása a korábban leírtak szerint történt.
Referenciaértékek meghatározása. Normális donorokban a semleges α-glükozidáz izoform aktivitása 14,52-25,9 uU/ml (= 19,32 uU/ml; SD = 1,13; SEM = 0,16) volt paraméteres módszerekkel. Nem normál módszerek esetén a normál tartomány 15,85-23,46 µU/ml között ingadozott (1. ábra).
A proteolitikus enzimek hatása. Az α-kimotripszin 0,1 és 10 mg/ml közötti koncentrációban történő növekedése nem változtatta meg jelentősen az α-glükozidáz aktivitást (2. ábra). Figyelembe véve, hogy a normálisan ajánlott (1 mg/ml) legfeljebb 10-szeres koncentrációkat alkalmazták a szeminás plazma feloldására károsodott cseppfolyósítású betegeknél.
A szemináris plazma elemzése fontos támogatást nyújt a férfi reproduktív rendszert érintő különféle patológiák diagnosztizálásához 19. Az α-glükozidáz enzim jelenlétének mennyiségi meghatározása közvetlenül korrelál az epididymus funkciójával. Ezért a referenciaértékeket meghaladó szintek közvetlenül kapcsolódnak a fertőzésben szenvedő betegekhez, és az alacsony szintek a vas deferens obstrukciójára vagy agenesisére utalnak, közel azonos értékekkel a vazektómiás betegeknél. Ennek a technikának a klinikai laboratóriumban történő megfelelő alkalmazásához meg kellett határozni a chilei populáció normál referenciaértékeit. 50 normál szeminalis analízissel rendelkező önkéntes mintában a parametrikus statisztikai módszert alkalmazták, amely kis mintamérettel 17 alkalmazható a teljes vizsgált populációra. A normál átlagos 19,32 µU/ml (SD = 1,13; SEM = 0,16) átlagértékből kapott eredmények nagyon hasonlóak voltak az európai populációnál leírtakhoz (20 µU/ml) 16 .
Az α-glükozidáz meghatározása a szemináris plazmában megbízható információt nyújt a mellékhártya szekréciós állapotáról, és különösen az invazív módszereket helyettesíti a spermiumok epididimiszből az elülső húgycsőbe történő transzportjának integritásának értékelésére, kizárva vagy megerősítve az obstruktív folyamatokat. Hasonlóképpen, annak soros meghatározása fontos lehet az akut gyulladásos folyamatok fejlődésének megismeréséhez, amelyek akadályozzák a spermium transzport útját obstruktív hatása vagy a megfelelő terápia utáni felbontása szempontjából.
Levelezés a: Prof. Dr. Raúl Sánchez G, Orvostudományi Kar Preklinikai Tudományok Tanszék, Universidad de La Frontera; 54-D. Doboz, telefon: (45) 325000; Fax: (45) 325777. E-mail: [email protected], Temuco-Chile.
Köszönöm
A szerzők köszönetet mondanak Dr. Med Vet Roberto Matamorosnak, az UCTEM Állatorvos-tudományi Iskolának az angol nyelvű kiadásban végzett értékes együttműködéséért.
HIVATKOZÁSOK
1. Iusem N, Pineiro L, Blaquer J, Belocopitow E. A fő szekréciós glikoprotein azonosítása patkány epididymisből: kölcsönhatás a spermiumokkal. Biol Reprod 1989; 40: 307-16. [Linkek]
2. Bedford J. Az emberi epididymis állapota és állapota. Hum Play 1994; 9: 2187-99. [Linkek]
3. Guerin J. Ben Ali H, Cottinet D, Rollet J. Seminal alphaglucosidase aktivitás az epididymális patológia markerként inazoospermiás férfiaknál, akik meddőséggel konzultálnak. J Andrology 1990; 11: 240-5. [Linkek]
4. Kalla N, Kaur S, Ujwal N, Mehta U, Joos H, Frick J. Alphaglucosidase aktivitás patkány epididymisben, különböző fiziológiai körülmények között. Nemzetközi. J Andrology 1997; 20: 925. [Linkek]
5. Purvis K, Egdetveit I. Egy -glükozidáz, ornitin-dekarboxiláz és poliaminok szegmentális eloszlása az emberi epididimiszben. J Reproduktivitás 1993; 97: 575-80. [Linkek]
6. Castellón E, Huidobro C. A glükozidáz-szekréció androgén-szabályozása humán epididymák hámsejtjeiben. Hum Play 1999; 14: 1522-7. [Linkek]
7. Tremblay R, Chapdeline P, Maihot J. a -1,4-glükozidáz aktivitás emberi spermában: variációk a spermiumok számával és mozgékonyságával. Termékenység és sterilitás 1979; 31: 592-3. [Linkek]
8. Paquin R, Chapdelaine R, Dubé J, Trembay R. Az emberi magvas plazma és az epididymális a -1,4-glükozidáz hasonló biokémiai tulajdonságai. J Andrology 1984; 5: 277-82. [Linkek]
9. Cooper T, Yeung C, Nashan D, Jockenhövel F, Nieschlag E. Javulás az emberi epididymális funkció értékelésében az inhibitorok alkalmazásával az alfa-glükozidáz magzati plazmájában történő meghatározásában. Nemzetközi J Andrology 1990; 13: 297-305. [Linkek]
10. Sandoval L, Díaz M, Rivas F. a -1,4-glükozidáz aktivitás és a csíra hámsejtjének jelenléte a spermában az obstruktív és nonobstruktív azoospermia differenciáldiagnózisához. Arch Andrology ezerkilencszázkilencvenöt; 35: 155-8. [Linkek]
11. Spiessens C, D 'Hooghe T. Wouters E, Meuleman C, Vanderschueren D. a -glükozidáz aktivitás magzati plazmában: prediktív érték az eredmény méhen belüli megtermékenyítéshez és in vitro megtermékenyítéshez. Termékeny steril 1998; 69: 735-9. [Linkek]
12. Krause W, Bohring C. Miért határozunk meg egy-glükozidáz aktivitást az emberi spermában meddőségi munka során?. Andrológia 1999; 31: 289-94. [Linkek]
13. Ludwig M, Kummel C, Schroeder-Printzen R-H, Weidner W. A szemináris plazma paraméter értékelése krónikus prosztatagyulladásban vagy leukocytosperniában szenvedő betegeknél. Andrológia 1998; 30: 41-7. [Linkek]
14. Peña P, Risopatrón J, Bizama R, Jorquera C, Henkel R, Miska W, Sánchez R. Savas izoformtól mentes alfa-glükozidáz mennyiségi meghatározása terméketlen betegeknél. A gyulladás hatása a férfi reproduktív traktusban. Termékeny steril 1998; 70 (Kiegészítés) 1: R-497. [Linkek]
15. WHO. Laboratóriumi kézikönyv az emberi sperma és a sperma-nyaki nyák kölcsönhatások vizsgálatához. Cambridge University Press, 1992. [Linkek]
16. Chapdelaine P, Tremblay R, Dubé J. P-nitrofenil-D-glükopiranozid mint a maltáz aktivitás mérésének szubsztrátja az emberi spermában. Klinikai kémia 1978; 24: 208-11. [Linkek]
17. Henry R, Cannon D, Winkelman J. Klinikai kémia, alapok és technikák. I. kötet, 2. kiadás. Barcelona: Editorial Jims, 1980; 35365. [Linkek]
18. Köhn, Jung, Pflieger-Bruss, Eberl, Schill, Schuppe, Hofmann. Das Spermiogramm, Praktische Anleitungen. Zentrum fúr Dermatologie und Andrologie; Arbeitsgruppe Medizinasubildung. Justus-Liebig-Universitat Giessen. Gaffkystrasse 14, 35385 Giessen. CD-ROM, (c) 1998. [Linkek]
19. WHO. Rowe PJ, Comhaire FH, Hargreave TB és Mellows HJ (szerk.) Kézikönyv a terméketlen pár standardizált vizsgálatához és diagnosztizálásához. Cambridge University Press, Cambridge, Egyesült Királyság. 1993. [Linkek]
20. Zöpfgen A, Priem F, Sudhoff F, Jung K, Lenk S, Loening SA, Sinha P. A sperma minősége és a karnitin, a-glükozidáz, a fruktóz, a citrát és a granulocita elasztáz és a spermium minősége közötti kapcsolat meddő férfiaknál normális népesség. Hum Play 2000; 15: 840-5. [Linkek]
21. Sanchez R. Peña P, Miska W, Henkel R. A spermium-kromatin és a szeminális α-glükozidáz kondenzációjának változékonyságának meghatározása a spermiogramhoz viszonyítva. Méd Chile tiszteletes 2000; 128: 483-489. [Linkek]
A magazin teljes tartalma, kivéve, ha azonosítják, a Creative Commons Licenc alatt van
Bernarda Morín 488, Providencia,
168. doboz, 55. levél
Santiago, Chile
Tel .: (56-2) 2753 5520