CENTRO DE INVESTIGACIONES BIOLÓGICAS DEL NOROESTE, SC Posztgraduális tanulmányi program A lipidek jelentősége a pátzcuarói fehér hal reprodukciójában és ontogenezisében TÉZISEK Benjamín Aparicio Simón La Paz, BCS, 2004. november

Benjamín Aparicio Simón

Természettudományi diplomamunka a természeti erőforrások felhasználásáról, kezeléséről és megőrzéséről az akvakultúrában. TUTORIÁLIS BIZOTTSÁG Dra. Elena Palacios Mechetnov Dr. Ilie S. Racotta Dimitrov Dr. Bertha Olivia Arredondo Vega TÉZISVIZSGÁLATI BIZOTTSÁG Dr. Elena Palacios Mechetnov Dr. Ilie S. Racotta Dimitrov Dr. Bertha Olivia Arredondo Vega ÉVFOLYAM VIZSGÁLAT JURY Draov Dra. Ilie S. Racotta Dimitrov Dr. Bertha Olivia Arredondo Vega Dr. Vicente Gracia López (póttag)

funkciókat. Ezenkívül az ARA retenció magasabb volt a tenyésztett organizmusokban, mint a vadak, ami arra utal, hogy az ARA hiányosságának kezelése során egy szabályozó mechanizmus működik annak megőrzésére. Nem találtak szignifikáns összefüggést egyes esszenciális zsírsavak és ezek zsírsav-prekurzorai között a vadon élő vagy tenyésztett halak tojásainál, ami azt jelzi, hogy a lárvák nem mutatják meg a megnyúlás és a deszaturáció mechanizmusát, hogy erősen telítetlen zsírsavakat (ARA, EPA és DHA) termeljenek, mert nincs meg az ebben a szakaszban szükséges enzimatikus mechanizmus, vagy mert a kezdeti szintek elég magasak voltak, legalábbis a korai szakaszban. Mindazonáltal az Artemia-val táplált előrehaladott stádiumokban nagyon alacsony DHA-szintet figyeltek meg, ami azt tükrözi, hogy ez a zsírsav nincs az étrendben. Az eredmények gyakorlati következményekkel járnak a tenyészállatok és a fehér hal lárváinak tápanyagigénye szempontjából: (1) A tenyésztett tenyészállományban és az ebből származó lárvákban valószínűleg szükség van az ARA kiegészítésére; (2) Meg kell határozni a DHA-val való kiegészítés szükségességét az előrehaladott lárvaszakaszokban.

ELHELYEZÉSEK A feleségemnek és a fiamnak, hogy mindig mellettem voltak, tanítottak és sok mindent együtt tanultak, teljes szeretetemmel. PÉREZ JUÁREZ ANGÉLICA ÉS APARICIO PÉREZ SAMUEL IAÍN APARICIO SIMÓN ZAMORA ÉS JUAN APARICIO OCHOA Testvéreimnek, akiktől mindig felbecsülhetetlen támogatást és szeretetet kaptam DIANA AIDA, NORA TONANTZÌN ÉS JUAN Családomnak a nagy támogatásért és motivációért, amely egyik vagy másik módon bizalmat és biztonságot váltott ki saját APARICIO-mban OCHOA CSALÁD, SIMÓN APARICIO ÉS JUÁREZ PÉREZ Annak emlékére, aki valódi értékeket öntött belém, és akinek példájával megtanultam mindig előre tekinteni ROLANDO APARICIO ALCAUTER

Ha az észlelés ajtajai megtisztulnának, minden a valóságnak tűnne az emberek számára: végtelen. Ugyanis az ember bezárkózott magában, amíg William Blake barlangjának keskeny repedésein keresztül mindent meg nem lát

Benjamín Aparicio Simón Általános Index ÁLTALÁNOS MUTATÓ Absztrakt absztrakt 1. Bevezetés 1 2. Háttér 5 2.1. Lipidek és zsírsavak: szerkezete és nómenklatúrája 5 2.2. Zsírsavak és lipidosztályok. 6 2.3. Esszenciális zsírsavak: édesvíz vs. tengeri 12 3. Indokolás 16 4. Hipotézis 18 5. Célok 19 6. Anyag és módszerek 20 6.1. Előzetes tesztek 20 6.2. Első vizsgálat: Szövetek vad tenyészállományból 20 6.3. Második tanulmány: A vadon termő és a termesztett növények ontogenitása 21 6.3.1. A tenyésztett szervezetek ívása 21 6.3.2. Vadon élő szervezetek ívása 22 a. Tojás és embrió mintavétele 23 6.3.3. Lárvakultúra és élő táplálék 24 a. Lárvák megszerzése 25 6.3.4. Zsírsavak meghatározása gázkromatográfiával 26 6.3.5. A lipidosztályok meghatározása Iatroscan segítségével 27 6.3.6. Mintavétel és zsírsavak összetétele az élelmiszerekben 28 7. Statisztikai elemzés 31 8. Eredmények 32 8.1. Első vizsgálat: Szövetek vad tenyészállományból 32 8.1. nak nek. Agy 32 8.1. b. Gonád 35 8.1. c. Máj 38 8.1. d. Izom 41 8.1. és. Zsírszövet 44

Benjamín Aparicio Simón Általános Index 8.2. Második tanulmány: Embriális és lárvafejlődés 47 8.2.1. Különbségek a vadon termesztett és a művelt 47 között. Zsírsavak a semleges frakcióban 58 b. Zsírsavak a poláris frakcióban 50 8.2.2. A tenyésztett szervezetek lárvafejlődése 55 a. Zsírsavak semleges frakcióban 55 b. Zsírsavak a poláris frakcióban 55 8.2.3. A lipidek változása a fejlődés során 60 8.2.4. Az esszenciális zsírsavak összefüggései 64 9. Beszélgetés 67 9.1. Zsírsavak az étrendben és befolyásolásuk a fehér vadállatok tenyészállományára 67 9.2. Zsírsavösszetétel a szövetekben 72 9.2.1. A nemek közötti különbségek 78 9.3. Lipidösszetétel a tojásban 82 9.4. Lipiddinamika a fejlődés során 89 9.5. Szintézis a lecithotrophia során 93 9.6. Az étrend hatása a tenyésztett lárvákra 95 10. Következtetések 99 11. Hivatkozások 101 12. Mellékletek 115 12.1. A. MELLÉKLET: A fehér hal taxonómiai elhelyezkedése 116 12.2. B. MELLÉKLET: Élelmezési kultúra (Artemia sp.) 117 12.3. C. MELLÉKLET: A fehér hal lárvakultúrája 118 12.4. D. MELLÉKLET: Zsírsavak elemzése 119

Benjamín Aparicio Simón Rövidítések RÖVIDÍTÉSEK (22: 6/20: 5): a DHA (22: 6n-3) és az EPA (20: 5n-3) (n-3/n-6) aránya: a zsírsavak aránya a n-3 és n-6 sorozat. ARA: arachidonsav BHT: cisz-butil-hidroxi-toluol: zsírsav cisz-konfigurációja DG: digliceridek DHA: dokozahexaénsav DMA: dimetil-acetál EPA: eikozapentaénsav MG: monogliceridek PL: foszfolipidek psu: sótartalom gyakorlati egységei Sat Index: telítési index TG transz: trigliceridek: zsírsav transz-konfigurációja Σ DMA: dimetil-acetál összege Σ HUFA: erősen telítetlen zsírsavak (4 vagy több kettős kötés) összege Σ MUFA: egyszeresen telítetlen zsírsavak összege Σ PUFA: többszörösen telítetlen zsírsavak összege (2 vagy több kettős kötés) Σ SAT: telített zsírsavak összege

Benjamín Aparicio Simón Bevezetés 4 és a jobb növekedés, különösen e faj táplálkozási szükségletein alapulva.

Benjamín Aparicio Simón 9. háttér megemeli a kortizolt, és ez magasabb halálozást eredményezhet, ha a testet krónikus stressz éri (Bell és Sargent 2003).

Benjamín Aparicio Simón Háttér 13 18: 2 (n-6) 18: 3 (n-6) 20: 3 (n-6) 20: 4 (n-6) 18: 3 (n-3) 18: 4 (n -3) 22: 4 (n-6) 22: 5 (n-6) ZSÍRSAVAK HOSSZÚ SZÁMA 20: 4 (n-3) 20: 5 (n-3) 18: 1 (n-9) 18: 2 (n-9) 22: 5 (n-3) 22: 6 (n-3) 20: 2 (n-9) 20: 3 (n-9) DELTA-6- DESATUREASE DELTAS-5- DESATUREASE DELTA-4 - DESATURE? 2. ábra - Telítetlen zsírsavak megnyúlása és deszaturációja (Sargent és mtsai., 1995). A különböző halak közötti különbségek másik oka a különböző fajok étkezési szokásainak tudható be, tekintve, hogy a húsevő szokásokkal rendelkező halakban nagyobb a 20 és 22 szénatomos zsírsav-ellátás, míg a szokásokkal vagy növényevőkkel rendelkezőknél nagyobb a táplálék-kínálat. 18 szénatomos zsírsavak (Sargent, 1995). Ezen túlmenően, a halak táplálékául szolgáló tengeri élőlények magasabb tengervízszinteket halmoznak fel, mint az édesvízi szervezetek, tekintettel a tengervíz sótartalmára, és néha alacsony hőmérsékleten, amelyben egyes fajok élnek (Whitney, 1974; Morris et al. 1982; Leray és mtsai, 1984; Dawes és mtsai, 1993; Navarro és mtsai, 1993b, Lee és mtsai, 1989; Tocher és mtsai, 1995, Farkas és mtsai, 2000). Ennek következtében az algákkal táplálkozó halaknak vagy a tengeri eredetű zooplanktonnak nagyobb a természetes Ft-tartalma, ezért nem kell szintetizálniuk ezeket a zsírsavakat.

Benjamín Aparicio Simón Háttér 15 e komponensek tápanyagigényének meghatározása és megfelelő étrendek kialakítása a termesztésük optimalizálása érdekében.

Benjamín Aparicio Simón Indokolás 17 különböző összefüggés: 1) a vadon élő nőstények és a hímek különböző szöveteiben a zsírsavösszetétel elemzése a szaporodási időszakban, amely lehetővé teszi a tartalék szövetekből (zsírszövet és máj) történő eltérő mobilizáció megjelenítését., elsősorban) az ivarmirigy felé, és 2) a zsírsavak variációjának elemzése a vadon élő és tenyésztett szervezetek ívásától számított ontogenitás során, amely lehetővé teszi annak felderítését, hogy vannak-e bizonyos hiányosságok a tenyésztett szervezetek esetében, valamint hogyan lehet megfigyelni a a különféle zsírsavak felhasználása, szintézise vagy konzerválása.

Benjamín Aparicio Simón Célkitűzések 19 5. CÉLKITŰZÉSEK Általános A fehér halak tojásainak, embrióinak és lárváinak lipidösszetételének elemzése annak érdekében, hogy megállapítsák a lipátok tápanyagigényének alapjait a pátzcuarói fehér hal lárva fejlődése során (Chirostoma vak). Részletek Határozza meg a zsírsavak koncentrációját és összetételét a fehér tőkehalállomány különböző szöveteiben. Határozza meg a zsírsavak és lipidek koncentrációját és összetételét a fehér halak embrionális és lárvafejlődésének különböző szakaszaiban.

Benjamín Aparicio Simón Anyag és módszerek 20 6. ANYAG ÉS MÓDSZEREK 6.1. Előzetes tesztek Egy előzetes tesztben meghatározták a fehértojás, embrió és lárva mintavételének módszertanát. Megállapították, hogy a zsírsav-meghatározások elvégzéséhez szükséges minimális mintamennyiség 30-50 mg tojás vagy lárva tömeg volt a figyelembe veendő hét szakasz mindegyikében. Megállapítottuk az egyes szakaszok petéinek, embrióinak és lárváinak átlagos tömegét annak érdekében, hogy megtudjuk, hány egyedet kellett megszerezni az egyes mintavételek során. 6.2. Első vizsgálat: A vadon élő szaporítók szövetei A felnőtt organizmusokat (5 nőstény és 5 hím) márciusban fogták el a Pátzcuaro-tóban található függőágy segítségével kereskedelmi halász organizmusoktól (Barriga-Tovar, 2000), és jégen vitték át az INIRENA létesítményekbe. A boncolás során máj-, izom-, agy-, mirigy- és zsírszövetmintákat nyertek, amelyeket 70 ° C-on lefagyasztottak a későbbi zsírsav-analízishez. A tóban planktonmintákat is vettek azoknak a zsírsavaknak az elemzésére, amelyek arányait (%) a IV. Táblázat mutatja.