étrendi

  • Tárgyak
  • Összegzés
  • Bevezetés
  • Eredmények
  • A DLA-M megakadályozta a súlygyarapodást a HFD-vel táplált patkányokban
  • A DLA-M gátolta az adipocita hipertrófiát in vivo
  • A DLA-M csökkentette a HFD fogyasztása által kiváltott hiperkoleszterinémiát
  • A DLA-M attenuált máj steatosis patkány májban
  • A DLA-M javítja a lipidek kiválasztódását keresztül bélmozgások
  • DLA-M immobilizált étrendi lipidek in vitro és in vivo
  • Vita
  • Mód
  • A DLA-M anyagai és előkészítése
  • Állatok és kezelés
  • Szérum lipid profil
  • Triglicerid, koleszterin és epesav elemzés.
  • DLA-M és lipid kölcsönhatás elemzése
  • A zsírszövet, a máj és a gyomor-bél traktus szövettani elemzése
  • statisztikai elemzés
  • további információ
  • Kiegészítő információk
  • Word dokumentumok
  • Kiegészítő információk
  • Hozzászólások

Tárgyak

Összegzés

Bevezetés

A túlsúly és az elhízás gyakorisága növekszik az egész világon, ami aggodalmat kelt e körülményeknek az egészségre gyakorolt ​​hatása miatt. A túlsúly és az elhízás 2010-ben világszerte körülbelül 3,4 millió halált okozott 1. A magas testtömeg-index (BMI) jól megalapozott, mint kockázati tényező különféle krónikus betegségek esetén2, például szív- és érrendszeri betegségek, cukorbetegség, rák és mozgásszervi betegségek, valamint a 3, 4, 5, 6 mortalitás szempontjából. A legújabb globális statisztikai elemzések azt mutatták, hogy a felnőttek 34,4% -a (33,2–35,5%) túlsúlyos (BMI ≥25), beleértve 12% -át (11,5–12,5%).) Az elhízottnak (BMI ≥ 30 kg/m 2) besorolt ​​felnőttek 2. Az Egyesült Államokban végzett felmérések azt jósolták, hogy az elhízás gyakoriságának figyelemre méltó növekedése csökkentheti a várható élettartamot 7. A túlsúly a súlyosan befolyásolja az életminőséget. Az elhízás emellett az egész világon az egyik legnagyobb egészségügyi kihívássá vált. Ezért az utóbbi években sürgősen szükségessé vált a zsírbetegség megelőzésére szolgáló módszerek meghatározása.

A zsíros ételek gyakoriak a napi étrendben, és ezek az ételek annyira finomak, hogy egyesek, különösen a gyerekek, nem tudnak ellenállni a túlevésnek. Megalapozott, hogy a zsír az elhízás fő oka. Ezért az elhízás megelőzése érdekében fontos az elfogyasztott lipidek immobilizálása és a lipid kiválasztás növelése az emésztőrendszerből történő lipid felszívódás csökkentése érdekében. A DLA-M, más néven montmorillonit, a bentonitból tisztított természetes adszorbens agyagásvány, amely a gyomor-bélrendszer nyálkahártya-gátjának fontos védőanyaga az akut és krónikus hasmenés kezelésére 8. A DLA-M egy réteges alumínium-szilikát, amelynek külső felületein vagy a lamináris térben 9 adszorpciós tulajdonságok vannak. A montmorillonit képes felszívni szerves anyagokat, baktériumokat, vírusokat, nehézfém-ionokat és egyéb 10, 11 anyagokat, és széles körben használják az iparban, a mezőgazdaságban és az orvosi kezelésben. Ugyanakkor egyetlen tanulmány sem vizsgálta a lipidek adszorpciós képességét; ezért nem világos, hogy a montmorillonit képes-e megakadályozni az elhízást lipidek adszorpciójával.

Jelen tanulmányban a DLA-M hatását vizsgáltuk a széklet lipidjeinek fokozott kiválasztódására a lipidek gasztrointesztinális rendszerben történő immobilizálása révén. Az in vivo HFD-vel táplált állatokkal végzett kísérletek eredményei azt mutatták, hogy a DLA-M befolyásolja a széklet lipidjeinek kiválasztódását, elkerülve ezzel az adipozitást triglicerid (TG) körülmények között és a koleszterin túlterhelést. Ezek az eredmények együttesen mutatják a DLA-M alkalmazásának lehetőségét a modern egészségügyben, valamint a kiegészítő és alternatív gyógyászatban az elhízás megelőzésére.

Eredmények

A DLA-M megakadályozta a súlygyarapodást a HFD-vel táplált patkányokban

A DLA-M testtömeg-növekedésre gyakorolt ​​hatásának meghatározásához a 2 hónapos hím Sprague Dawley (SD) hím patkányokat normál étrenddel vagy DCA-val etettük 25 napig, és egyidejűleg DLA-M-mel (1 g/kg/kg) kezeltük. nap). A HFD patkányok 5-10 napos etetés után szignifikánsan nehezebbek voltak, mint az étellel táplált patkányok. Ez a tendencia a kezelési periódus alatt fennmaradt. A 25 napos kezelési periódus végén a HFD + DLA-M csoportba tartozó patkányok súlya lényegesen kisebb volt, mint a HFD-ben lévő patkányoké (1a., B. Ábra). A relatív napi táplálékfogyasztás nem különbözött csoportonként (1c. Ábra). A Lee Obesity Index megbízhatóan megjósolja a testzsír százalékát a patkányokban 12. Kiszámítottuk a Lee elhízási indexét (súly: 0,33/nasoanalis hossz) az összes patkány esetében (1d. Ábra).

Testsúly ( nak nek ), reprezentatív patkányok ( b ), a relatív táplálékfelvétel ( c ) és a Lee elhízási indexe ( d ) hím patkányokban, normál étrenddel (Chow), magas zsírtartalmú étrenddel (HFD) vagy HFD-vel, DLA-M Gavage-vel (1 g/kg/nap) 25 napig. Az eredményeket átlag ± sem értékként adjuk meg (n = 10 minden csoportra). * P # P 2) (2e. Ábra). Ezek az eredmények együttesen azt sugallják, hogy a DLA-M megakadályozta a HFD elhízási hatását.

Bruttó megjelenési különbségek ( nak nek ) és a zsírszövet/testtömeg arány ( b ) patkányok (n = 10). ( c ) Patkányok Epi-WAT szakaszainak H&E festése ( nak nek ) (skála: 100 μm). Átlagos adipocita méret ( d ) és az adipocita méreteloszlása ​​( és ) minden csoportban (n = 5, kezelési csoportonként 20 mikroszkópos képet kaptunk). Az eredményeket átlagként ± sem * P # P ## P 0,05) mutatjuk be (3d. Ábra). A DLA-M által okozott szérum lipidkoncentrációk csökkenése arra utal, hogy a HFD által kiváltott hiperkoleszterinémia mértéke csökken.

A szérum TC szintjei ( nak nek ), TG ( b ), LDL-c ( c ) és HDL-c ( d ) normál táplálékkal, HFD-vel vagy HFD-vel DLA-M szondával táplált patkányokon 25 napig (n = 10). Az eredményeket átlag ± sem * P # P-ként mutatjuk be

A máj bruttó megjelenése ( nak nek ) és a máj/testtömeg arány ( b ) kísérleti patkányok (n = 10). A májszakaszok H&E és olaj-vörös-O festése ( c patkányok ( nak nek ) (skála: 50 μm, a máj lipidje vörösnek tűnik). A máj TG-koncentrációi ( d ), TC ( és ), FC ( F ) és CE ( g ) elemzését a vizsgálat végén végeztük (n = 7). Az eredményeket átlag ± sem * P # P-ként mutatjuk be

Az ürülék vízkoncentrációjának szelvénydiagramjai ( nak nek ), trigliceridek ( b ) és az összes koleszterinszint ( c ) az egyes csoportok patkányaiban (n = 8). ( d ) A széklet kenetének testfestése (a semleges lipidek zöldnek tűnnek) és a jelzett csoportokból származó patkányok DLA-M kristályainak (sárga nyilak) polarizált fénymikroszkópos vizsgálata (skála: 20 μm). Az eredményeket átlag ± sem ** P # P ## P-ként mutatjuk be

DLA-M-t, magas zsírtartalmú takarmányt (HFF) és HFF + DLA-M-t adtunk a megfelelő mennyiségű desztillált vízhez, hogy keneteket kapjunk, majd Bodipy-vel és Oil-Red-O-val festettük. Polarizált fénymikroszkóppal DLA-M kristályokat találtunk in situ. A DLA-M kristályok in vitro rögzítették a lipideket, amint azt a 6f. Ábra és az 1c. Mivel a DLA-M nem jut be a 14 véráramba, lipideket detektáltunk, amelyeket a DLA-M immobilizált a gyomor-bél traktusban in vivo. A hím CD-1 egereket normál étrenddel vagy HFD-vel tápláltuk 3 napig, és egyidejűleg DLA-M-mel (1 g/kg/nap) kezeltük őket. Amint a 7a. Ábra mutatja, izoláltuk a gyomor-bél traktust (gyomor, nyombél, jejunum, ileum és vastagbél), hogy fagyott szakaszokat és tartalmi keneteket kapjunk. A bodipy (7b. Ábra, c) és az olaj-vörös-O (kiegészítő 3a, b ábra) festés azt mutatta, hogy a DLA-M-lel immobilizált lipidek a gyomor-bél traktusban. A DLA-M hatását az elhízás kialakulásának megakadályozásában az étkezési lipidek immobilizálásával és a lipidek emésztőrendszerből történő kiválasztásának javításával foglalja össze a 8. ábra.

( nak nek ) Az egér emésztőrendszerének mintavételi helyeinek sematikus bemutatása. ( b ) Az emésztőrendszer szakaszainak Bodipy- és DAPI-festése a ( nak nek ) normál táplálékkal, HFD-vel vagy HFD-vel táplált egerekből DLA-M szondával (1 g/kg/nap) 3 napig (skála: 200 µm). ( c ) A gyomor-béltartalmú testek festése a HFD + DLA-M egerekből; a felső paneleken a semleges lipidek zöldnek tűnnek, az alsó panelek pedig a DLA-M kristályok polarizált fénymikroszkópos vizsgálati képei (sárga nyilak) (skála: 50 μm) (Chow, n = 3; HFD, n = 5; HFD + DLA -M, n = 5).

Teljes méretű kép

Teljes méretű kép

Vita

A hiperlipidémia általában az elhízás és az étrend választása miatt alakul ki 23. Noha a hiperlipidémia tünetmentes, a szérum koleszterinszintjének tartós emelkedése szív- és érrendszeri betegségeket okozhat 24, például érelmeszesedést (AS) 25, szívkoszorúér-betegséget (CD) 26 és magas vérnyomást 27. A TC és az LDL-c megemelkedett szintje és a HDL-c csökkent szintje növeli az AS és a CD 28 kialakulásának kockázatát. Adataink azt mutatták, hogy az elhízás megelőzése mellett a DLA-M egyértelműen csökkentette a TG, TC és LDL-c szintet (3a-c. Ábra). Ezért azt javasoljuk, hogy a HLA-t fogyasztók számára a DLA-M hipolipidémiás hatást fejthessen ki, amely segít megelőzni az AS-t és a CD-t. A máj létfontosságú belső szerv és fő szervszabályozó, amely táplálékanyagok, például cukrok, lipidek és fehérjék felhasználásával felelős a metabolikus homeosztázis fenntartásáért 29. A DLA-M orális beadása drámai módon csökkentette a májban a HFD által kiváltott TG, TC és EC szint emelkedését és a máj hipertrófiáját (4. ábra). Eredményeink azt mutatják, hogy a DLA-M gátolja a máj lipid felhalmozódását, amely fontos szerepet játszhat a HFD fogyasztásával járó zsírmáj megelőzésében.

Az epesav fontos szerepet játszik a bél lipidanyagcseréjének szabályozásában30. A DLA-M minimális adszorpciós kapacitással rendelkezett az epesavval szemben (2a., B. Kiegészítő ábra). Az epe jelenlétében és hiányában a bélkörnyezetben tapasztalható fiziológiai viszonyok utánzásához a kondicionált táptalajt érett 3T3-L1 adipocitákkal kezeltük, amely nagy mennyiségű különféle lipideket tartalmaz, és a normál étrenddel vagy HFD-vel táplált egerek béltartalmát különböző DLA-M koncentrációk. A DLA-M mindkét rendszerben felszívja a TG-ket és a koleszterint (6b-e. Ábra).

Mód

A DLA-M anyagai és előkészítése

A Mayer H&E-t és az Oil Red-O-t a Sigma-Aldrich cégtől szereztük be. A BODIPY® 493/503-at a Thermo Fisher Scientific, Inc.-től szereztük be. A DLA-M-t a laboratóriumunkban kifejlesztett fizikai ülepítési módszerrel izoláltuk és tisztítottuk Xinjiang bentonit agyagból. Először a bentonit agyagot kellően megőrölték és 180 mesh szitán átengedték, majd desztillált vizet adva 5% -os diszpergált szuszpenziót képeztek, amelyet 25-30 percig kevertek. A szuszpenziót 10 órán át hagytuk ülepedni, és a felülúszót háromszor centrifugálással leszűrtük. Harmadszor, megfelelő mennyiségű pelyhesítőszert adunk a seriflow finomításához, amelyet ezután bepárolunk, levegőn szárítunk és újra őrölünk. A végső DLA-M termék törtfehér por volt, és vízzel elkeverve oldhatatlan gélt képezett.

Állatok és kezelés

A 2 hónapos hím CD-1® (ICR) egereket három csoportra osztottuk a fent leírt kezelésekkel (n = 3-5, mindegyik). A HFD + DLA-M csoport 3 napig DLA-M-t (1 g/kg/nap) kapott. A gasztrointesztinális rendszert (gyomor, duodenum, jejunum, ileum és vastagbél) nemrégiben izolálták, hogy fagyasztott metszeteket és tartalomkeneteket kapjanak.

Szérum lipid profil

A vérmintákat meghatározott időpontokban gyűjtöttük. A szérum TC, TG, HDL-c és LDL-c koncentrációkat automatizált kémiai analizátorral (OLYMPUS AU400, Japán) határoztuk meg.

Triglicerid, koleszterin és epesav elemzés.

A lipidek és az epesavak koncentrációját a májban és a székletben a megfelelő kereskedelemben kapható 33, 34 készlet segítségével mértük. A szöveti trigliceridek vizsgálati készletét (E1013), a szöveti teljes koleszterin-vizsgálati készletet (E1015) és a szövet nélküli koleszterin-vizsgálati készletet (E1016) az Applygen Technologies Co. Ltd.-től (Peking, Kína) vásároltuk. A teljes epesav-vizsgálati készletet (E003-1) a Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute-tól szereztük be. (Nanjing, Kína). A széklet víztartalmát Karl Fischer 35 módszerrel mértük .

DLA-M és lipid kölcsönhatás elemzése

Az in vivo kísérlethez nemrégiben izolálták a gyomor-bélrendszert (gyomor, nyombél, jejunum, ileum és vastagbél). A dióban gazdag bélszegmenseket ezután 10 µm-es szakaszokra vágtuk. Ezenkívül az egerek béltartalmát szétválasztottuk, és kime-m keneteket készítettünk, amelyeket Bodipy-vel vagy Oil Red-O-val festettek. Az in vitro kísérlethez megfelelő mennyiségű DLA-M, HFF és HFF desztillált vizet adtunk DLA-M-hez, hogy keneteket kapjunk, amelyeket Bodipy vagy Oil Red O-val festettünk. A semleges lipideket zöld fluoreszcenciaként jelenítettük meg abszorbancia hullámhosszon. fluoreszcens mikroszkóppal (ZEISS Imager M1, Németország). A metszeteket és a keneteket lipidmegfigyelés után összegyűjtöttük, és polarizált ZEISS Imager M1 mikroszkóppal vizsgáltuk a DLA-M kristályok in situ 36 kimutatására. A kondicionált táptalajt érett 3T3-L1 adipocitákkal összegyűjtöttük, mint 37 felett, és a bélharang tartalmát a fent leírtak szerint szétválasztottuk, hogy utánozzuk a bélkörnyezet fiziológiai körülményeit kvantitatív elemzés céljából.

A zsírszövet, a máj és a gyomor-bél traktus szövettani elemzése

A zsír- és májszöveteket 4% -os formaldehidben rögzítettük, paraffinba ágyazottuk, 5 μm-es szakaszokra vágtuk, és H&E-vel festettük a szokásos eljárások szerint 38. Kezelési csoportonként húsz mikroszkópos képet készítettünk, és az adipociták méretét a Cell Profiler 39, 40 szoftver segítségével elemeztük. A gyomor-bél traktus, a máj és a széklet fagyasztott szakaszait és a megfelelő keneteket Bodipy vagy Oil-Red O festékkel tettük láthatóvá.

statisztikai elemzés

A három ismételt kísérletből kapott adatokat átlag ± sem-ként fejezzük ki. A csoportok közötti különbségeket statisztikailag elemeztük egyirányú ANOVA alkalmazásával, amelyet Tukey többszörös összehasonlító tesztjei, valamint a párosítatlan t-teszt követett. A különbségeket statisztikailag szignifikánsnak tekintettük, ha a P érték kevesebb, mint 0,05.

további információ

Hogyan lehet idézni ezt a cikket: Xu, P. és mtsai. Az elhízást megelőző szer, a montmorillonit felszívja az étrendből származó lipideket, és javítja a lipidek emésztőrendszerből történő kiválasztódását. Sci. Rep. 6., 19659; doi: 10.1038/srep19659 (2016).

Kiegészítő információk

Word dokumentumok

Kiegészítő információk

Hozzászólások

Megjegyzés beküldésével vállalja, hogy betartja a közösségi feltételeket és irányelveket. Ha valami visszaélést tapasztal, vagy nem felel meg feltételeinknek vagy irányelveinknek, kérjük, jelölje meg nem megfelelőnek.