Cryptococcus gattii izolált gepárd (Acinonyx jubatus) a Kuba Nemzeti Állatparkból

acinonyx

Cyptococcus gattii gepárdból (Acinonyx jubatus) izolálva a kubai nemzeti állatkertben

Jorge Luis Polo Leal I; Carlos Manuel Fernández Andreu II; Gerardo Martínez Machín III; María Teresa Illnait Zaragozí III; Mayda Rosa Perurena Lancha IV

Én a tudomány mestere. Nemzeti Állatpark. Havana City, Kuba.
II. Tudományos doktor. Vezető kutató. Mikológiai laboratórium, "Pedro Kourí" Trópusi Orvostudományi Intézet (IPK). Havana City, Kuba.
III II. Mikrobiológiai szakember. Segédkutató. Mikológiai laboratórium, IPK. Havana City, Kuba.
IV. Mikrobiológiai végzettség, bakteriológiai és mikológiai mester. Segédkutató. Mikológiai laboratórium, IPK. Havana City, Kuba.

BEVEZETÉS: A kriptococcosis, a Cryptococcus nemzetség fajai által okozott szisztémás mikózis, az utóbbi években jelentősen megnövelte incidenciáját, főként az emberi immunhiányos vírus által okozott fertőzéssel társulva. Állatokon is leírtak, bár alacsony gyakorisággal.
MÓDSZEREK: A havannai Nemzeti Állatkertben fogságban tartott női gepárd (Acinonyx jubatus) esetét mutatták be. A dél-afrikai állat hirtelen fogyással, aszténiával, étvágytalansággal és légzési nehézséggel, bőséges orrváladékozással kezdődött.
Eredmények: ezen váladék mikológiai vizsgálataival kimutatták a Cryptococcus gattii B szerotípus jelenlétét. Az állat eredete és fogságban tartása miatt becslések szerint a fertőzés nem kevesebb, mint 16 hónapok.
KÖVETKEZTETÉSEK: Kubában mindeddig a Cryptococcus összes klinikai izolátuma megfelel a C. neoformans var. grubii, tehát a becslések szerint a fertőzést az állat származási országában szerezték meg. Ez jelenti a C. gattii első izolálását Kubában egy olyan állatból, amelyet Dél-Afrikából hoztak be, ahol ez a gomba endemikus.

Kulcsszavak: Cryptococcus gattii, Acinonyx jubatus, gepárd, Cryptococcosis, Kuba.

BEVEZETÉS: A Cryptococcus fajok által okozott cryptoccosis szisztémás mycosis az elmúlt években jelentősen megnövelte incidenciáját, elsősorban az emberi immunhiányos vírus fertőzésével összefüggésben. Állatoknál is leírtak, de ritkán.
MÓDSZEREK: Egy nőstény gepárd (Acinonyx jubatus) esetét mutatták be a havannai Nacional Állatkertben. Az állat Dél-Afrikából származott. Kezdett fogyni, és aszténia, étvágytalanság és légzési problémák szenvedtek bőséges orrszekrécióval.
EREDMÉNYEK: Ezen váladékok mikológiai vizsgálata a B szerotípus Cryptococcus gattii jelenlétét tárta fel. Az állat származása és fogságban tartása miatt úgy gondolták, hogy a fertőzés legalább 16 hónapig látens volt.
KÖVETKEZTETÉSEK: Kubában mind a mai napig minden klinikai Cryptococcus izolátum C. neoformans var. grubii, ezért úgy vélik, hogy a fertőzést a női gepárd származási országában fogták el. Ez az első C. gattii izolátum Kubában egy olyan állatból, amely Dél-Afrikából származik, ahol ez a gomba endémiás.

Kulcsszavak: Cryptococcus gattii, Acinonyx jubatus, gepárd, cryptococcosis, Kuba.

BEVEZETÉS

A kriptococcosis a Cryptococcus nemzetség fajai által okozott szisztémás mikózis, amelyek közül a klinikailag a legjelentősebbek a C. neoformans és a C. gattii, amelyek jelenleg szoros rokonságban álló fajok komplexumába tartoznak, ugyanakkor elégséges különbségekkel rendelkeznek ahhoz, hogy elkülönült fajoknak lehessen tekinteni. 1

Ez a mycosis az utóbbi években jelentősen megnövelte incidenciáját, elsősorban az emberi immunhiányos vírus által okozott fertőzéssel összefüggésben. 2 Különböző állatfajoknál, mind a házi, mind a vadon élő állatoknál is leírtak, bár alacsony gyakorisággal. 3-5 Kubában mind a mai napig a Cryptococcus összes klinikai izolátuma megfelel a C. neoformans var. grubii (korábban C. neoformans var. neoformans A szerotípus); éppen ellenkezőleg, a C. gattii-t soha nem izolálták az országban. 6 Ez a munka bemutatja a C. gattii első izolálását és jellemzését Kubában egy nőstény gepárd (Acinonyx jubatus) kóros termékeiből, amely körülbelül 12 hónapos korában érkezett az országba Dél-Afrikából, és amelyet a húsevő terület a Nemzeti Állatparkban (PZN).

Miután 16 hónapot töltött fogságban, a minta hirtelen fogyást, aszténiát, étvágytalanságot és légzési nehézségeket kezdett mutatni bőséges orrváladékozással, ezért a megfigyelés és a kezelés érdekében a központ állatorvosi klinikájára helyezték át; semmilyen megnyilvánulást nem találtak más szervekben vagy rendszerekben. Az orrváladékból steril törlőkendővel vettünk mintákat, és mikroszkópos megfigyelés céljából Grammel festett kenetet készítettünk. A tamponokat Sabouraud glükóz-agarjára klóramfenikollal és véragarral oltottuk, és 28 ° C-on, illetve 37 ° C-on inkubáltuk, amíg a mikrobiális növekedés makroszkopikus bizonyítékai meg nem jelentek.

48 órás inkubálás után élesztő növekedést figyeltünk meg mindkét táptalajban. Az izolált törzset a "Pedro Kourí" Trópusi Orvostudományi Intézet mikológiai laboratóriumába küldték, ahol a Cryptococcus nemzetség azonosítását megerősítették az indiai tintával végzett kapszula megfigyelésével, az ureaz termelésével, a kukoricaliszt agarban a filamentálódás hiányával, inozitol asszimiláció és pigmenttermelés napraforgómag agarban (Helianthus annus). CGB táptalaj (L-kanavanin-glicin-bróm-timol kék) és tárgylemez agglutináció (Crypto Check; Iatron Laboratories, Tokió, Japán) alkalmazásával a törzset C. gattii B. szerotípusként azonosítottuk. 1

Noha a C. neoformans és a C. gattii hasonló kulturális jellemzőkkel bírnak (nyálkás megjelenés és fehér vagy krémszín, ha Sabouraud glükóz-agaron termesztik őket), számos fiziológiai tulajdonsággal rendelkeznek, amelyek lehetővé teszik megkülönböztetésüket: nitrogénforrásként D-prolin, D-triptofán, L-almasav és kreatinin, míg a glicint szén- és nitrogénforrásként használják; ellenálló a cikloheximiddel (1,6 ug/ml) és az L-kanavaninnal szemben. E két faj biokémiai viselkedésében mutatkozó különbségek lehetővé tették a különböző táptalajok tervezését, amelyek elérik azonosításukat. A CGB táptalaj továbbra is a legelterjedtebb e két faj klinikai izolátumoktól való megkülönböztetésére, és az L-kanavaninnal szembeni rezisztencián, valamint a glicin szén- és nitrogénforrásként történő felhasználásán alapul, amelyet a C gattii alkalmaz. ammónia és a táptalaj lúgosítása, amely színváltást eredményez sárga színről intenzív kékre. 3.7

Míg a C. neoformans főleg immunhiányos egyéneket érint, és minden szélességi fokon beszámoltak róla, addig a C. gattii főként immunkompetens egyedeket fertőz meg, és trópusi és szubtrópusi területeken gyakrabban izolálták. Megállapították azonban Európában, mérsékelt vagy mediterrán éghajlatú területeken és az amerikai kontinens mérsékelt égövében. Ez a faj volt felelős a Vancouverben bekövetkezett súlyos járványért is, amely később Kanadának és az Egyesült Államok kontinentális területeire is átterjedt, és nemcsak a területen lakó populációt érintette, hanem legalább 5 állatfajt is, mind a házi, mind az USA-ban. szabadon élni. 8,9 Az elmúlt években világszerte feltörekvő fajnak tekintették. 10 Elterjedtsége magas többek között Ausztrália, Brazília, Mexikó, Thaiföld, Közép-Afrika és Kalifornia déli részein. 3 Dél-Afrika, a gepárd származási országa, amely a tanulmány tárgya, szintén endemikus területnek számít a gomba fertőzésében. tizenegy

Azon állatfajok közül, amelyekből a C. gattiit izolálták, vannak többek között macskák, kutyák, lovak, juhok, kecskék, rókák, görények, főemlősök, delfinek, koalák; 3-5,8, azonban a leginkább érintettek a macskák, amelyeknél a betegség általában a vizsgált gepárdmintában leírtakhoz hasonló légzési tünetekkel jár. A macskák különösen fogékonyak mindkét Cryptococcus faj fertőzésére, ami lehetővé tette a betegség jobb jellemzését ezekben az állatokban és általában a macskákban. 12.

Ezekben az emlősökben a fertőzés belégzéssel nyerhető el, amely a felső légutakat, elsősorban az orrüreget érinti. A leggyakoribb kép a rhinitis, amely bőséges váladékozással krónikussá válhat, amelyet az orrüreg deformációja követ az esetek 70% -ában, a granulomák jelenléte miatt a betegség előrehaladott stádiumában. A nasopharynx is sérülhet, a rales és a dyspnea termelésével. Általában a mandibularis ganglionok megnagyobbodnak, és elterjednek a paranazális szubkután szövetre. Más esetekben a fertőzés neurológiai megnyilvánulásokkal, például depresszióval, ataxiával és koordinációs zavarokkal, perifériás vaksággal és retinitissel éri el a központi idegrendszert (CNS). 12.13

A nagy macskák közül a gepárdok voltak az egyik leginkább érintett faj, a klinikai képek nagyon hasonlóak a macskáknál leírtakhoz. Berry és mtsai (1997) a tüdő kriptokokóma és a meningoencephalomyelitis diagnózisát (mikrobiológiai, radiológiai és hisztopatológiai) diagnosztizálták Acinonyx jubatus fogságban tartott mintájában mind a 4 végtag szubakut ataxiájával. 14 A központi idegrendszeri kriptococcosis további 2 esetét Bolton és mások dokumentálták ugyanannak a fajnak a fogságban tartott egyedei között, amelyek a neurológiai megnyilvánulások mellett a légzőrendszer károsodását is jelentették; 15 nemrégiben Millward és Williams kimutatták a kriptococcosis jelenlétét egy szabadon élő gepárdban, légzőszervi és neurológiai károsodásokkal. 4 Az említett 3 jelentés a dél-afrikai Acinonyx jubatus példánya volt, és a kórokozó a C. gattii volt, amely egybeesik a jelen esettel.

Egyes szerzők szerint a macska immunhiányos vírusfertőzés hajlamosító tényező lehet a kriptococcosisra, ennek a vírusnak vagy a macska leukémiás vírusnak a jelenlétét azonban egyik dél-afrikai állat sem bizonyította; Elfogadhatóbbnak tűnik az a szerep, amelyet ezeknek az emlősöknek a C. gattii betegség kialakulására való hajlamában, a fogság stresszében és a gepárdok különböző populációi között meglévő csekély genetikai változatosságban játszhat. 4

Számos kísérlet ellenére a C. gattii még soha nem volt izolálva Kubában a környezeti forrásoktól (nem publikált adatok), ezért feltételezhető, hogy a vizsgálat állati objektuma származási országában fertőzött volt. Ha igen, akkor azt is feltételezhetjük, hogy az inkubációs idő 16 hónapnál hosszabb volt. A közlekedés és a fogság által okozott stressz körülményeinkben több hónap vagy év után aktiválhatta a látens fertőzést. Noha az inaktív vagy látens fertőzést legfeljebb 110 hónapig írták le, 16 McDougall és Fyfe becslése szerint az embereknél előfordult C. gattii fertőzés, a járvány során elvégzett vizsgálatok alapján 6 és 8 hónap közötti inkubációs periódus történt. Vancouver. 17.

A gepárdok vagy gepárdok (Acinonyx jubatus) az úgynevezett nagy macskákhoz (Carnivora rend; Felidae család) tartoznak, főként a Szaharától délre fekvő Afrika és Ázsia egy része kiterjedt és nyitott szavannáiban terjesztenek, ahol vadászni tudnak zsákmányára (általában közepes méretűre). méretű patások); A 18 jelenleg azon fajok közé tartozik, amelyeknek nagy a veszélye a vadon pusztulásának, ezért a Nemzetközi Természetvédelmi Egyesület a veszélyeztetett kategóriába sorolta. 19.

Korábbi jelentésekben az izolációval kapcsolatos részleges és hiányos információk jelentek meg, 20–22., Amelyek zavart kelthettek a C. gattii Kubában való létével kapcsolatban; Ez azonban az első olyan munka, amely a lehető legteljesebb információt nyújtja a dél-afrikai Acinonyx jubatus példányáról, amely a Nemzeti Állattani Parkban pusztult el e faj által okozott kriptokokózissal. .

1. Bovers M, Hagen F, Boekhout T. A Cryptococcus neoformans sokfélesége - Cryptococcus gattii komplex. Rev Iberoam Micol. 2008; 25: S4-S12.

2. Warnock DW. Gombabetegségek: a közegészségügy egyre növekvő kihívása. Med Mycol. 2006; 44: 697-705.

3. Sorrell TC. Cryptococcus neoformans fajta gattii. Med Mycol. 2001; 39: 155-68.

4. Millward IR, Williams MC. Cryptococcus neoformans granuloma a szabadon mozgó gepárd (Acinonyx jubatus) tüdejében és gerincvelőjében. Klinikai jelentés és szakirodalmi áttekintés. J S Afr Vet Ass. 2005; 76: 228-32.

5. McGill S, Malik R, Saul N, Beetson S, Secombe C, Robertson I, Irwin P. Cryptococcosis háziállatoknál Nyugat-Ausztráliában: retrospektív tanulmány 1995-2006 között. Med Mycol. 2009; 47: 625-39.

6. Fernández Andreu CM, Martínez Machín G, Illnait Zaragozí MT, Perurena Lancha MR, González Miranda M. Cryptococcus neoformans var. neoformánok kubai klinikai izolátumokban. Rev Cubana Med Trop. 1998; 50: 167-9.

7. Klein KR, L csarnok, Deml SM, Rysavy JM, Wohlfiel SL, Wengenack NL. A Cryptococcus gattii azonosítása L-kanavanin-glicin-bromotimol-kék táptalaj és DNS-szekvenálás segítségével. J Clin Microbiol. 2009; 47: 3669-72.

8. Stephen C, Lester S, Black W, Fyfe M, Raverty S. A cryptococcosis többféle fajtájú járványa a déli Vancouver-szigeten, Brit Columbia. Can Vet J. 2002; 43: 792-4.

9. Galanis E, MacDougall L. Cryptococcus gattii epidemiológiája, Brit Columbia, Kanada, 1999-2007. Emer Infect Dis. 2010; 16: 251-7.

10. Springer DJ, Chaturvedi V. A Cryptococcus gattii globális előfordulásának előrejelzése. Emer Infect Dis. 2010; 16: 14-20.

11. Morgan J, McCarthy KM, Gould S, Fan K, Arthington-Skaggs B, Iqbal N és mtsai. Cryptococcus gattii fertőzés: a magas HIV-szeroprevalenciával rendelkező dél-afrikai tartományban azonosított esetek jellemzői és epidemiológiája, 2002-2004. Clin Infect Dis. 2006; 43: 1077-80.

12. Castellá G, Abarca ML, Cabañes FJ. Cryptococcosis és társállatok. Rev Iberoam Micol. 2008; 25: S19-S24.

13. Malik R, Wigney DI, Muir DB, Gregory DJ, Love DN. Cryptococcosis macskáknál: 29 eset klinikai és mikológiai értékelése, valamint a kezelés alakulása orálisan alkalmazott flukonazol alkalmazásával. J Med Vet Mycol. 1992; 30: 133-44.

14. Berry WL, Jardine JE, Espie IW. Tüdő kriptococcoma és cryptococcus meningoencephalomyelitis egy királygepárdban (Acinonyx jubatus). J Zoo Wildl Med. 1997; 28: 485-90.

15. Bolton LA, Lobetti RG, Evezard DN, Picard JA, Nesbit JW, Van Heerden J és mtsai. Cryptococcosis fogságban lévő gepárdban (Acinonyx jubatus): két eset. J S Afr Állatorvos. 1999; 70: 35-9.

16. Garcia-Hermoso D, Janbon G, Dromer F. Epidemiológiai bizonyítékok alvó Cryptococcus neoformans fertőzésre. J Clin Microbiol. 1999; 37 (10): 3204-9.

17. MacDougall L, Fyfe M. A Cryptococcus gattii újszerű környezetben való megjelenése nyomokat nyújt inkubációs periódusára. J Clin Microbiol. 2006; 44: 1851-2.

19. Nemzetközi Természet- és Természeti Erőforrás-védelmi Unió (IUCN). A veszélyeztetett fajok nemzetközi vörös listája. 2009.2 verzió. 2009. [Idézve: 2009. november 23.]. Elérhető: http://www.iucnredlist.org

20. Baró T, Torres-Rodríguez JM, Morera Y, Alía C, López O, Méndez R. Cryptococcus neoformans izolátumok klinikai és környezeti forrásokból származó szerotipizálása Spanyolországban. J Clin Microbiol. 1999; 37: 1170-2.

21. Torres-Rodríguez JM, Morera Y, Baró T, López O, Alía C, Jiménez T. In vitro A Cryptococcus neoformans szerotípusok érzékenysége a sordarin osztályú GM 237354 származékokra. Mycoses. 2002; 45: 313-6.

22. Torres-Rodríguez JM, Alvarado-Ramírez E, Gutiérrez-Gallego R. Különbségek az ureaz enzim aktivitásában a Cryptococcus neoformans és a Cryptococcus gattii között. Rev Iberoam Micol. 2008; 25: 27-31.

Beérkezett: 2010. február 15-én.
Jóváhagyva: 2010. május 4.

Dr. Carlos M. Fernández Andreu. Mikro Laboratórium, Trópusi Orvostudományi Intézet "Pedro Kourí". 601 AP, 11300 CP. Havanna városa, Kuba. E-mail: [email protected]

A magazin teljes tartalma, kivéve, ha azonosítják, a Creative Commons Licenc alatt van