fenntartása

  • Összegzés
  • Fő
  • ANYAGOK ÉS METÓDUSOK
  • Állatok és vizsgálati protokoll.
  • Probiotikumok
  • Diéta.
  • Növekedés és súlygyarapodás.
  • Plazma glükóz, inzulin, aminosavak, karbamid és kortizol.
  • Aminosav nyomjelzők infúziója és elemzése.
  • A transzlációs iniciációs faktorok és az összes ubiquitinizált fehérje elemzése.
  • Statisztikai elemzés.
  • EREDMÉNYEK
  • Súlygyarapodás és növekedés.
  • Plazma glükóz, inzulin, kortizol, aminosavak és a fehérje forgalma az egész testben.
  • Vázizomfehérje-szintézis, transzlációs iniciációs faktorok és ubiquitinált fehérjék.
  • Leucin-összefüggések a plazmában.
  • VITA
  • Szójegyzék

Összegzés

Fő

A sovány tömeg csökkenésének megakadályozására különféle eszközök, köztük anabolikus gyógyszerek és/vagy enterális táplálék-kiegészítők (11) használhatók. E stratégiák célja az anabolikus állapot fenntartása a PS stimulálásával és a proteolízis minimalizálásával. Vázizom szempontjából ezek a megközelítések stimulálják a fehérje transzlációjának megindulását az mTOR útvonalon keresztül, csökkentik a proteolitikus aktivitást (különösen az ubiquitin által közvetített proteolízist) vagy mindkettőt. Ez a sejthatás a vázizomzat frakcionált szintézisének (FSR) növekedését, valamint a normális növekedés és az izomtömeg fenntartását eredményezi.

Az enterális táplálkozás hatékony lehet az izomveszteség és a növekedés visszamaradásának megelőzésében az IBD-ben azáltal, hogy növeli az inzulin által közvetített sejtjeleket, amelyek elindítják a PS-t vagy a tápanyagok elérhetőségének közvetlen növekedését. A megemelkedett plazma aminosavak, különösen a leucin, anabolikus hatása jól megalapozott, és mind egészséges malacokban (12, 13), mind a "szeptikus" malacokban (14) bebizonyosodott. Ezenkívül egy nemrégiben végzett klinikai tanulmány kimutatta, hogy a hiperinsulinémia és a betegség remissziója Crohn-betegségben vagy fekélyes vastagbélgyulladásban szenvedő felnőtteknél összefüggésben van (15). Ezért az energiahiány ellenére állandó tápanyagellátással fenntartható a növekedés és a PS.

Korábban a tanulmányban használt malacokon bizonyítottuk, hogy a probiotikus kiegészítés növelte a máj PS és az albumin szintézisét, de nem befolyásolta a betegség súlyosságát vagy a vastagbél PS szintjét (16). A stimulált máj PS váratlan eredménye alapján a célunk az volt, hogy feltárjuk, vajon a probiotikumok hasonló anabolikus hatást váltanak-e ki a vázizomzatban, hogy enyhítsék az izomveszteséget, ami az IBD-ben bekövetkező csökkent táplálékfelvételhez és gyulladáshoz kapcsolódik. Mások kimutatták, hogy a probiotikus kiegészítés az IBD potenciális kiegészítő terápiája mind felnőttek, mind gyermekek esetében (17–19). A probiotikumok legtöbb klinikai vizsgálata azonban a tünetek kezelésére és a remisszió kiváltására összpontosított, de nem a táplálkozási állapotra.

Következésképpen ez a tanulmány az állandó enterális táplálás hatását vizsgálta megfelelő makrotápanyag-bevitel mellett, 50% -uknak makrotápanyagok szükségesek, vagy 50% -ánál probiotikus kiegészítőkkel kellett szembenézniük egy akut vastagbélgyulladással szemben. Az állandó táplálási megközelítést alkalmazzuk az inzulin és az aminosav koncentrációjának növelésére. Az inzulin és a leucin által közvetített sejtjelek tartós stimulálását feltételezték, hogy stimulálják a nettó anabolikus sejtes folyamatokat. Ezért hipotézisünk az volt, hogy 1) a megfelelő tápanyagbevitel fenntartása megakadályozza a növekedés károsodását és fenntartja az izom PS arányát, és 2) a probiotikumok beadása nem gyengíti az izomnövekedés és a PS csökkenését az élelmiszer-korlátozásra reagálva, malac colitis modellben.

ANYAGOK ÉS METÓDUSOK

Állatok és vizsgálati protokoll.

Probiotikumok

A C-MRP malacok 450 × 109 CFU VSL # 3-at (VSL Pharmaceuticals, Gaithersburg, MD) kaptak napi 1 csomagként 30 ml-es étrendben, 15 ml-t naponta kétszer). Az adagolás rágcsálókon és emberen végzett vizsgálatokon alapult, testtömeg (0,73) felhasználásával az anyagcsere-testméretek (22–24) között.

Diéta.

A tojásalbuminon és a tejsavófehérjén alapuló étrendeket laboratóriumunkban fogalmaztuk meg az előzőekben leírtak szerint (16). Az étrendeket naponta 16 órán át infúzióval kezeltük (Compat Feeding Pump; Novartis Nutrition, Kanada), hogy a gyomor katéteren keresztül 24 órán keresztül 300 ml/kg-ot juttassunk el a táplálkozás szempontjából megfelelő 925 kJ kg −1 d −1 energiafogyasztáshoz REF/C-WN és az ajánlott 461 kJ · kg −1 · d −1 bevitel 50% -a C-MR/C-MRP malacoknál (25, 26). A beviteleket naponta módosították a súly alapján, és 50% -ban korlátozott étrendet kiegészítettek, hogy ugyanazok a mikroelem-bevitelek maradjanak fenn, mint a REF és a C-WN csoportok, hogy elkerüljék a növekedést, a PS-t vagy a gyulladás súlyosságát befolyásoló mikroelem-hiányokat.

Növekedés és súlygyarapodás.

A vizsgálat kezdetén és a 14. napon érzéstelenítéssel mértük a fangtól a farig hosszát és a mellkas kerületét. A testtömeget naponta mértük.

Plazma glükóz, inzulin, aminosavak, karbamid és kortizol.

A metabolitokat a 14. napon gyűjtött plazmában mértük a marker infúzió 6 órájában. Az inzulint a sertés inzulin RIA-jával mértük (Linco Research, MO). A glükózt glükóz-oxidázzal határoztuk meg (GM7 Micro-Stat, Analox Instruments, MA). Az aminosavakat reverz fázisú HPLC-vel (Beckman Coulter) határoztuk meg, az oszlop előtti oftaldialdehid automatikus derivatizálása után (27). A karbamidot és a kortizolt automatizált klinikai kémiai analizátorral mértük (Hitachi 911 modell, ON, Kanada).

Aminosav nyomjelzők infúziója és elemzése.

A nyomjelző l- [gyűrű-2H 5] fenilalanint (98% -ban dúsítva) állandó infúzióként (35 μmol/kg) (35 μmol · kg –1 · h –1) adtuk be 6 órán keresztül táplált állapotban 14. nap Vérmintákat vettünk kiinduláskor és óránként az infúzió alatt. A longissimus dorsi (LD) és a gyors rángatózást, illetve a lassú rángást okozó oxidatív glikolitikus izomrostokat jelentő longissimus dorsi izmokat azonnal eltávolítottuk, miután a malacokat nátrium-pentobarbitállal levágtuk. Aminosavakat (az n-propil-észter-heptafluor-butiramid származékai) a plazmában és az izomban állítottuk elő, a korábban leírtak szerint (20). A fenilalanin dúsulását negatív kémiai ionizációs gázkromatográfia-tömegspektrometriával (Hewlett Packard Model 5988A, CA) elemeztük, az ionok [M-FH] monitorozásával - a 383 és 388 tömeg/töltés arányában, megfelelnek a címkézetlen és a címkézetlen jeleknek ionok, ill. Nyomjelző: a nyomarányokat meghatároztuk a nyers ionmennyiség és a nyomjelző és a természetes fenilalanin mennyiségének elemzésével (16, 20).

A fenilalanin fluxust a fennsíkon lévő marker hígításából számítottuk a fenilalanin csoportba, amint azt leírtuk (16). Az egész test fehérjeforgalmát a fenilalanin fluxusából számítottuk ki a malacokban található fehérje fenilalanintartalma (3,7 g/100 g) alapján (28). A kevert fehérjék FSR-jét LD-ben és maszterben határoztuk meg, mint a fehérjéhez kötött fenilalanin-dúsulás növekedési sebességét az intracelluláris szabad csoport fenilalanin-dúsulásával szemben (20). A fenilalanin dúsítását vegyes plazmafehérjékben a kiindulási állapotban helyettesítő anyagként használták az izomfehérjék kezdeti vagy háttérgazdagításához.

A transzlációs iniciációs faktorok és az összes ubiquitinizált fehérje elemzése.

Az étrend és a probiotikumok transzlációs iniciációs faktorok aktiválására gyakorolt ​​hatásainak értékeléséhez csak az LD mintákban vizsgáltuk az mTOR és szubsztrátjainak, a p70S6K1 és 4E-BP1 foszforilációját. A fagyasztott LD mintákat az eIF4E * 4E-BP1 komplex és a foszforilált Akt, mTOR, S6K1 és az S6, eIF4E, 4E-BP1 fehérje (27, 29, 30) foszforilált elemzéséhez dolgoztuk fel. Az ubiquitin által közvetített proteolízis indexeként az összes ubiquitinizált fehérje szintjét az LD mintákban immunoblot-módszerrel határozták meg, a korábban leírtak szerint (27).

Statisztikai elemzés.

Az összes adatot SPSS 11.0 verzióval (SPSS Inc., Chicago, IL) elemeztük, és átlag ± SEM értékként jelentettük. A napi súlygyarapodást ismételt ANOVA mérésekkel elemeztük. A folyamatos változókat egyirányú ANOVA-val elemeztük, majd posthoc legkisebb négyzetek különbségével és Dunnett-féle teszttel végeztünk összehasonlítást a C-WN csoportot összehasonlító csoportként használó csoportok és p

A malac testtömege naponta. REF, fekete négyzetek; C-Ny-i, nyitott háromszögek; C-MR, nyitott körök; C-MRP, szürke négyzetek. Átlag ± SEM, n = 8; * o

A kevert vázizomfehérjék frakcionált szintézisének sebessége. LD FSR (fekete oszlopok) és masseter FSR (fehér oszlopok). Átlag ± SEM, n = 8; * o

A - D panelek, az ubiquitinált mRNS és a fehérje transzlációjának molekuláris kontrolljai. A, Relatív foszforilezett Akt (fekete sávok) és mTOR (fehér sávok). B, relatív foszforilezett 4EBP1 (fekete oszlopok) és eIF4E * 4E-BP1 komplex (nyitott oszlopok). C, relatív foszforilált p70S6K1 (fekete oszlopok) és riboszomális fehérje S6 (nyitott oszlopok). D, relatív összes ubiquitinizált fehérje. Átlag ± SEM; * p −1d −1) és a foszforilezett p70S6K1 szintjével (r = 0,45, p

A plazma leucin-koncentráció (μmol/L) Pearson-korrelációja az (A) súlygyarapodással (gkg −1d −1; r = 0,46, p C-MR

makrotápanyag-korlátozott vastagbélgyulladás

vastagbélgyulladás makrotápanyagok és probiotikumok korlátozásával

jól táplálkozik vastagbélgyulladással

dextrán-szulfát

frakcionált szintézis sebessége

Gyulladásos bélbetegség

protein szintézis

egészséges és jól táplált referencia malacok