nyál

В
В 		В

Igény szerinti szolgáltatások

Folyóirat

  • SciELO Analytics
  • Google Tudós H5M5 ()

Cikk

  • Spanyol (pdf)
  • Cikk xml formátumban
  • Cikk hivatkozások
  • Hogyan lehet idézni ezt a cikket
  • SciELO Analytics
  • Automatikus fordítás
  • Küldje el ezt a cikket e-mailben

Mutatók

  • Idézi SciELO
  • Hozzáférési statisztikák

Kapcsolódó linkek

  • Hasonlóak a SciELO-ban

Compartir

Vital Fogászat

ISSN 1659-0775 on-line verzió ISSN 1659-0775 nyomtatása

Vitális fogászat В n.26В San Pedro, Lourdes de Montes de Oca 2017. január/június.

A nyál klinikai diagnózisa. Felülvizsgálat

A nyál klinikai diagnózisa. Felülvizsgálat

1 Costa Rica-i Latin Egyetem, Costa Rica, [email protected]

Kulcsszavak: В Biomarkerek; gyógyszeres kezelés; immunhisztokémia; FRET; zselatin-szimbólum; DNS mikroarray

Kulcsszavak: В Biomarkerek; gyógyszeres kezelés; immunhisztokémia; FRET; zselatin-szimbólum; DNS mikro-sugarak

Ma már ismert, hogy az egészségi állapotnak és a betegségnek molekuláris alapja van, és ennek alapja egy interdiszciplináris eszköz: a biokémia. Minden helyes klinikai kritériumnak biokémiai igazolása van.

A munka bemutatásakor megjelenő molekulaszerkezet egy mátrix metalloproteináz, MMP 12. Az ilyen típusú enzimek megismerése, az általa végzett funkció és két antagonista esemény: a sejtnövekedés és a differenciálódás, amely egy domén. az élet, és a rák áttétje, amely a halál területe, sok kutatási erőfeszítést igényelt.

Az 1В MMP 12 ábra az enzim aktív helyén lévő cinkatomon keresztül az NNGH inhibitorához kötődik. Kristálytani szerkezet PDBВ-ben

NCBI (Nemzeti Biotechnológiai Információs Központ). Elérhető: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/.

• NLM (Országos Orvostudományi Könyvtár). Elérhető: http://dtd.nlm.nih.gov/.

• EBSCO Health. Elérhető: https://health.ebsco.com/?_ga=1.46795623.1501374684.1472540416.

- Pubmed. Elérhető: www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed.

• IIB-INTECH (Biotechnológiai Kutató Intézet-Chascom Technológiai Intézet). Elérhető: http://www.iib.unsam.edu.ar/web/papiros.php?a=

• előzetes költségvetési tervezet. Protein Data Bank: Elérhető: www.rcsb.org/pdb/

• BRENDA adatbázis (Kölni Egyetem Biokémiai Intézete, Németország). Elérhető: www.brenda.uni-koeln.de

• NIH, USA Nemzeti Orvostudományi Könyvtára. Elérhető: https://www.nlm.nih.gov/

Egy másik szempont, amely nem részesíti előnyben a vér mint DNS-forrás kinyerését, az az, hogy különleges megőrzési és szállítási feltételeket igényel.

Ezenkívül az eritrociták hemoglobin-vasával is szennyezhető; amely a polimeráz láncreakcióban (PCR) használt enzim, a DNS polimeráz inhibitora, amely befolyásolja a DNS későbbi elemzését. (Hernandez, 2012)

Az olyan országokban, mint Kanada, egyedi gyógyszerek felírására használják a pszichiátriai betegségek kezelésében.

Ez az alkalmazás a nyálból származó genomiális DNS felhasználására épül az egyetlen nukleotid polimorfizmus (SNP) vizsgálatában; amelyek lehetővé teszik a citokróm P-450 (CYP-450) típusú enzimeket expresszáló gének variációinak megállapítását. Ezek az enzimek részt vesznek az antidepresszánsok és az antipszichotikumok máj metabolizmusának I. fázisában. (Hasan, 2016)

2В ábra CYP3A4. Részt vesz több mint 40 gyógyszer metabolizmusában. Kristálytani szerkezet a PDB-ben.В

Az SNP típusú polimorfizmusok háromféle affektust okozhatnak.

• Az anyagcsere sebességének növekedése, a gyógyszer normál adagjának hatástalanná tétele.

• Az enzimanyagcsere képességének csökkenése, ami a gyógyszer szabad frakciójának növekedéséhez és káros hatásokhoz vezethet.

• Az enzim nem expresszálódása, amelynek következtében az ember nem képes metabolizálni a gyógyszert, ami akut mérgezést okoz.

Protokollokat alkalmaznak a mintavételhez, a megőrzéshez és a vizsgálati helyre történő szállításhoz. Az extrahált DNS nem szennyezettsége az első lehetőség szerint UV/V spektrofotométerrel állapítható meg. 280 nm-en fehérjékkel és 230 nm-en szervetlen vegyületekkel történő szennyeződés. A DNS-jelet 260 nm-en jelentik egyetlen spektroszkópiai csúcs jelenlétével.

A DNS minőségének kritériuma az A260/A280 arány 1,8-2,0 között.

A gélelektroforézis célja a DNS tisztaságának javítása, degradációs folyamatok igazolásának ellenőrzése, valamint a frakció méretének meghatározása molekulatömegű markerek alkalmazásával. Végül a DNS működését a polimeráz láncreakcióval (PCR) ellenőrizzük, amely néhány óra alatt lehetővé teszi egy korábban kiválasztott DNS szekvencia nagyszámú másolatának megszerzését.

3В ábra A genom DNS nyálból történő kinyerésének szakaszai.

4В ábra Leukocita kemotaxis leukotaxinnal

Az anyatej és a nyál között számos egyetértési pont van, mivel mindkettő tartalmazza:

• Mindkét folyadék átlagos pH-ja alacsonyabb, mint a vérplazma. Az anyatej 6,6 körüli és a nyál 6,5-7,5 között van; a nem stimuláltnál, bár a stimulált nyál pH-ja kissé magasabb lehet a HCO3 szekréciójának növekedése miatt.

5В ábra A MEC fő alkotóelemei

A proteoglikánok lineáris (elágazás nélküli) nagy molekulatömegű glükánokat kötnek megismétlődő diszacharid egységekkel. A kötőszövet és a porc makrótámogató struktúrái.

A sejtnövekedés és differenciálódás során az ECM-ben átalakulás történik a mátrix metalloproteinázok (MMP) által, amelyek az ECM fehérjék lebontásával lehetővé teszik a sejtek migrációját. Ezek a mátrixváltozások szükségesek, de komplex aktivációs-gátlási folyamatokkal kell őket szabályozni; Ha ezek a folyamatok megváltoznak, az ECM elveszíti elszigetelő funkcióját, ami a rák és az arteriosclerosis bizonyos formáiban fordul elő. (Stryer, 2015)

Ezek a törlések megerősítik az MMP 3 fontos szerepét az ideggyulladásban. (Christianson, 2012)

6. ábra Az extracelluláris mátrix kötőszövetének vázlata a hámréteget alátámasztó bazális réteg alatt

7В ábra NNGH inhibitor. Az MMP 12 1. ábrán látható felépítésében jelenik meg

fluoreszcens kromofor csoportokat használ (fluoroforok).

Az hisztopatológiai vizsgálatokban az immunhisztokémia széles spektrummal alkalmazható metasztázisos vagy metasztázisos daganatok diagnosztizálására és osztályozására. Monoklonális antitestekkel előrejelzések és előrejelzések állapíthatók meg a daganatokkal kapcsolatban; tanulmányokat végez vírusos vagy tumoros antigénekről; a szöveti fehérjék azonosítása és az immun komplexek kimutatása, hatékonyabb kezelések elérése révén.

Az aktív kaszpáz-3 hasítás Bid fehérjét hasít a Bcl-2 apoptózis komplexből. A Bid aktiválása növeli a mitokondriális membrán permeabilitását, ami a citokróm c, az apoptózist felerősítő intracelluláris effektor szivárgását okozza. Így az immunohisztokémia lehetővé teszi a beteg szájüregi szövetekben az apoptotikus válasz különbségeinek megállapítását. (Nelson és Cox, 2014)

DNS mikroarray elemzés

8В ábra balra: a mikrorajda felülete több ezer üreggel. Jobb; a mikroray mikrocavitációja egy adott gén beillesztett másolataival.

9. ábra: A DNS mikroarray vizsgálat szakaszai

Ezeknek a tanulmányoknak a kihívása az, hogy magas betartási arányt érjenek el a betegadományokban, valamint hatékony és olcsó mintagyűjtési, -megőrzési és -szállítási rendszert, amely lehetővé teszi a genomi DNS-bankok létrehozását a nagyszabású vizsgálatok támogatása érdekében.

Ebben az értelemben a nyálmintavétel számos előnye nyilvánvaló.

• Megakadályozza a vénaszúrást és a kapcsolódó fertőzési kockázatokat, mind a betegek, mind az egészségügyi személyzet számára.

• A minták szállítását szobahőmérsékleten hajtják végre, és a postai szolgáltatás igénybe vehető.

• A mintagyűjtést nem befolyásolják olyan betegek speciális körülményei, mint az idősek, újszülöttek és koraszülöttek, vagy érkompromittáltak.

• A mintavétel a betegek beleegyezésével annyiszor elvégezhető, ahányszor szükséges.

• A klinikai és toxikológiai elemzések terén tapasztalt nagy technológiai fejlődésnek köszönhetően a genomi DNS felhasználása mellett számos meghatározás elvégzését teszi lehetővé.

Noha a nyálminták bizonyos hátrányokkal járnak a vérmintákkal kapcsolatban, ezeket nagyrészt megoldották anélkül, hogy befolyásolnák előnyeiket.

• Egyes orális baktériumok enzimatikus aktivitása megzavarhatja egyes vizsgálatokat.

• Az ételtörmelék és a nyálka jelenléte a mintákban ellensúlyozta a minta térfogatának növekedését és a szűrési folyamatokat.

11. ábra A nyál diagnózisának alkalmazásai

Ennek számos előnye van: az egyetemeken végzett emberi potenciál felhasználása, az epidemiológiai vizsgálatokhoz alkalmazható adatbázisok fejlesztése, valamint a diagnózis és a kezelés javítása. Az ilyen értelemben vett politikák kidolgozása hatással lenne a fogászatra, mind a tantervek szintjén, mind a klinikai gyakorlatban.

Abraham, J.E. et őt. (2012). A nyálminták életképes alternatívát jelentenek a vérmintákkal szemben, mint DNS-források a nagy teljesítményű genotipizáláshoz. [В linkek]

Bahlo M. és ГЎl. (2010). A nyálból származó DNS jól teljesít nagyszabású, nagy sűrűségű egynukleotidos polimorfizmus mikroray-vizsgálatokban. Rák epidemiol biomarkerek és megelőzés. 19 (3): 794-798. [В linkek]

Barriga, A. G és Hernndez, S. E. (2016). A nyálminták hasznossága a laboratóriumi diagnosztikában. Rev. Latinoam Patol Clin Med Lab. 63 (1): 13-18. Elektronikus változat elérhető: http://www.medigraphic.org.mx/ [В Linkek]

Buys, Diego L. et ГЎl. (2007). Az immunhisztokémia alapvető értelmezése. A különféle antitestek általános jellemzői, valamint a sejtek és a sejtek alatti elhelyezkedésük. Patológia. Latin-amerikai magazin. 45 (3): 126-140. [В linkek]

C. A. Christianson, B. L. Fitzsimmons, J. H. Shim et al. (2012). A gerincmátrix metalloproteináz 3 TNF-függő mechanizmuson keresztül közvetíti a gyulladásos hiperalgéziát. Idegtudomány 200 199-210. [В linkek]

CastrillÃn LE, Palma A, MacÃn S. (2011). A laktoferrin szerepe parodontális betegségekben. Mexikói Odontológiai Magazin; 15 (4): 231 - 238. [Linkek]

Devlin, M. T. (2015). Biokémia. I. és II. 4. kiadás. Szerkesztői Reverte. [В linkek]

Hansen, T.V. et őt. (2007). Vér-, nyál- és bukkális sejtminták gyűjtése a dán nővér kohorszon végzett kísérleti tanulmányban: a válaszarány és a genomi DNS minőségének összehasonlítása. Rák epidemiol biomarkerek és megelőzés. 2072-2076. [В linkek]

Hasan M, Siegmund és W. Oswald S. (2016). Rapid LC-MS/MS: módszer a 4-hidroxi-koleszterin/koleszterin arány meghatározására a szérumban, mint endogén biomarker a humán és csikók CYP3A aktivitására. J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci. Augusztus 5.; 1033-1034: 193-199. [В linkek]

Hernandez, A. A. és Aranzaz, G. C. (2012). A nyál jellemzői és fizikai-kémiai tulajdonságai: áttekintés. Tiszteletes UstaSalud. 11 (101-111). [В linkek]

James, C. és munkatársai. (2011). Az Oragene® öngyűjtő készlettel összegyűjtött nyálminták emberi genomi DNS-tartalma. DNS Genotek. PD-WP-011 4/11. Kiadás. [В linkek]

Leite, A. F. et ГЎl. (2016). A hasított kaszpáz-3 immunexpressziója alacsonyabb apoptotikus területindexeket mutat az ajakkarcinómákban, mint az intraorális rák esetében. J Appl szóbeli tudomány. Júl-aug. 24 (4): 359-365. [В linkek]

Mathews, C. K. és Гl. (2013). Biokémia. 4. kiadás. Szerkesztőségi Pearson. [В linkek]

Murray, R. K. és mtsai. (2015). HARPER. Illusztrált biokémia. 29. kiadás. McGraw Hill. [В linkek]

Nelson, D. L. és M. M. Cox (2014). Lheninger. A biokémia alapelvei. 6. kiadás. Szerkesztői Omega. [В linkek]

Novoa-Herrà © n, Sandra S. (2011). Az IGF-II stimulálja az MMP-9 és MMP-2 aktivitást egy humán trofoblaszt modellben. Acta Biologica Colombiana 16 (1): 121-132. [В linkek]

SEBIA (2015). Agaróz gél elektroforézis. Hidragél 7 fehérje (E). Ref. 4100 [LinkekВ]

Stryer, Lubert (2015). Biokémia klinikai alkalmazásokkal. I. és II. 7. kiadás. Szerkesztői Reverte. [В linkek]

Todorovic, I. Dozic és mtsai. (2006). Nyálenzimek és parodontális betegség. Med Oral Patol Oral Cir Bucal 2012; 11: 115 - 119. [LinkekВ]

Beérkezett: 2016. szeptember 03 .; Jóváhagyva: 2016. október 14

 Ez egy cikk nyílt hozzáféréssel jelent meg Creative Commons licenc alatt