Veracruz Egyetem
Kutatási cikk
Jacqueline Moreno-Fitz 1, Idalia Medina-Salazar 1, Viridiana ChÃvez-HernÃndez 1, David ElÃas-Vià ± as 2 és Leticia Verdugo-DÃaz 1
Összegzés
Absztrakt
Kulcsszavak: Parkinson-kór, mágneses stimuláció, tirozin-hidroxiláz, egyensúly, nyílt terepi teszt.
1. Bemutatkozás
2.1. Patkányok
58 Wistar törzsű hím patkányt alkalmaztunk, amelyek a kísérlet kezdetén 180-200 g tömegűek voltak, akril dobozonként (16x37x18cm) 2 állat csoportjaiban, azonos hőmérsékleti körülmények között (20-22 ° C), fényciklusokban.: sötétség (12:12), étel és víz igény szerint. Valamennyi állatot a kutatási állatok gondozására és felhasználására vonatkozó irányelvekben meghatározott elvek szerint kezeltük. 9.
2.2. Kísérleti terv
2.3. Sérülések és műtétek
A CM-nek való expozíciót a vizsgálat két hónapja alatt napi két órán keresztül végeztük a megfelelő alcsoportokkal. Az akrildobozt, ahol az állatok rendesen éltek, fém fedele nélkül, a stimulációs periódusok alatt a tekercspár közepébe helyezték (1. ábra). A dobozok belsejében a hőmérséklet 23,4 ± 0,4 ° C volt, ez a paraméter a stimulálás 2 órája alatt állandó maradt.
2.5. Viselkedési tesztek
2.5.1. Amfetamin okozta fordulatok
2.5.2. A curling testtartás értékelése
Ebben a tesztben a farok utolsó harmadának rágcsálóját 1–2 cm-re függőleges helyzetben tartjuk és 1 percig felemeljük. Akkor kell rögzíteni, ha a test testének legalább 10 0 В-os eltérését figyeljük meg egyik vagy másik irány (bal vagy jobb) felé, referenciaként az állat függőleges testtengelyét vesszük figyelembe. Ha nem mutatja, hogy a fejét balra vagy jobbra döntené, akkor nullának számít.
2.5.3. Mérlegkaron
A rágcsálót 1 cm vastag és 100 cm hosszú farúdra helyezzük, amelyet a padlótól 80 cm-re emelünk. A teszt megkezdése előtt a rágcsálókat úgy kell kiképezni, hogy a farkánál fogva veszik őket, és először helyezik el őket 25 cm-re az akrildoboztól, és arra ösztönzik őket, hogy járjanak a rúd mentén, amíg el nem érnek egy akrildobozt, amelynek fűrészporral azonosítják őket. biztonságos területen, ezt követően 50 cm, 75 cm és végül 1 méter távolságokon edz. Ezt követően a tesztet úgy kezdik, hogy az állatot a doboztól távolabb hagyják, és stopperrel azt az időt veszik igénybe, amely a másik végéhez ér és a doboz megérintéséhez szükséges. Miután kiképezték, a tesztet ötször hajtják végre. Ha a patkány nem fejezi be a túrát, vagy nem érinti a dobozt, azt 120 másodpercként rögzítik (maximális futási idő).
2.5.4. Nyílt terep
2.6. Szövettan és immunhisztokémia a TH ellen
2.7. Statisztikai analízis
3.1. Amfetamin által kiváltott mozgás
3.2. A curling testtartás értékelése
Ebben a tesztben, amelynek célja a testtartás, valamint az egyik vagy másik irány iránti tendencia mérése a test fő tengelyéhez viszonyítva, nem találtunk szignifikáns különbséget egyik vizsgált csoport között sem (az adatokat nem mutatjuk be).
3.3. Az egyenleg értékelése
3.4. A viselkedés értékelése a nyílt terepen
A nyílt terepi teszt paramétereit (teljes megtett távolság, mozdulatlansági idő és az érintések száma) az 1., 2. és 3. táblázat mutatja. A teszt 15 percében megtett teljes távolság (1. táblázat) azt mutatja, hogy a sérült állatok megtették kevesebb távolság a kezdetektől, mint az ép állatok és a hamisan sérült állatok. Az összes kísérleti csoportban a teljes utat csökkent a stimuláció utáni két értékelés (30 és 60 nap). A csökkenés azonban csak az intakt állatoknál volt szignifikáns a második értékelésnél (F (2,15) = 6,898; p = 0,0075)
Csoportok (n)
bazális
30 nap
60 nap
IВ В (12)
I + CMВ (6)
Álnokság (6)
Álnév + CMВ (6)
LxВ (14)
Lx + CMВ (14)
Csoportok (n)
bazális
30 nap
60 nap
IV (12)
I + CMВ (6)
Álnokság (6)
Álnév + CMВ (6)
LxВ (14)
Lx + CMВ (14)
A 3. táblázat mutatja, hogy hányszor keltek fel az állatok, amikor két első lábukkal megérintették a mező falát. Ebben a paraméterben, amely információkat tartalmaz a motoros aktivitásról és a szökés (szorongás) kereséséről, szignifikáns különbségeket figyeltünk meg a csoportok között. A kiindulási tesztben a sérült állatok mutatták a legalacsonyabb értékeket az ép és hamisan sérült állatokhoz képest. A kísérlet 60. napján az ép állatok szignifikánsan csökkentették ezt az értéket (F (2,15) = 9,604; p = 0,0021), ellentétben a sérült állatokkal, akik ezt jelentősen megnövelték (F (2,36) = 4,475; p = 0,00184 ). A CM alkalmazása differenciált változásokat indukál az érintések számában, a kísérleti csoporttól függően. Sértetlen állatoknál a stimuláció megakadályozza a falak érintésének csökkenését.
Végül a CM-vel megsérült állatok 30 nap alatt növelték a falak érintéseinek számát (nem szignifikáns különbség), bár később ez az érték 60 napos stimuláció után ismét csökkent, hasonlóan az alapvizsgában bemutatott értékhez.
A FALOK ÉRINTÉSE
Csoportok (n)
IV (12)
I + CMВ (6)
Álnokság (6)
Álnév + CMВ (6)
LxВ (14)
Lx + CMВ (14)
3.5. Immunhisztokémia
A 4. ábra három kísérleti csoportból (ép, sérült és két hónapig CM-nek kitett sérültekből) származó állatok reprezentatív fényképfelvételét mutatja be. Kimutatták, hogy mindkét sérült csoportnak nincs TH immunreakciója a sérült oldalon.
4. ábra A metszetek mikroszkópos felvétele a striatum szintjén, tirozin-hidroxilázzal (TH) szemben immunreaktivitással. A) ép állati szakasz. B) a jobb oldali elváltozással rendelkező állat reprezentatív szakasza (immunreakció hiánya) és C) hamis elváltozású patkány szakasz (sóoldat injekciója). Az A. ábrán látható fekete sáv 1,5 mm-nek felel meg.
4. Megbeszélés
4.1. Viselkedési hatások
4.1.1. Amfetamin által kiváltott rotációk
4.1.2. Testtartás értékelése
4.1.3. Egyensúly és mozgás
4.2. Az ebben a vizsgálatban alkalmazott állatmodell különbségei és hasonlóságai a PD-vel emberben.
4.3. Lehetséges alkalmazások PD-ben szenvedő betegeknél
5. Következtetés
6. Köszönetnyilvánítás
A PAPIIT által finanszírozott projekt 217812-ben. Köszönjük Antonia Rojas Terrazas asszonynak az állatok fenntartásában és gondozásában nyújtott nagy segítségét.
7. Összeférhetetlenség
A szerzők kijelentik, hogy nincsenek összeférhetetlenségek.