GRANADAI EGYETEM GYÓGYSZERÉSZETI FIZIOLÓGIA KAR TÁPLÁLKOZÁSI ÉS ÉLELMISZER-TECHNOLÓGIAI INTÉZET MATAIX JOSÉ A DNS-STABILITÁS VIZSGÁLATA TÁPLÁLKOZÓ FERROPENIKUS ANEMIÁK HELYZETÉBEN. A Kecske- vagy tehéntej fogyasztásának befolyása, dúsítva vagy nem vasalva DOKTORI TÉZISEK

egyetem

Szerkesztő: A Granadai Egyetem szerkesztősége Szerző: Silvia María Hijano Fernández D.L.: GR 3091-2010 ISBN: 978-84-693-3316-7

Ez a doktori értekezés jelentése az AGL2006-02301/ALI kutatási projekt része, amelyet az Oktatási és Tudományos Minisztérium Tudományos és Műszaki Kutatási Főigazgatósága (DGICYT) támogat.

Javier Díaz Castro úr. Posztdoktori alkalmazott a Granadai Egyetemen. Ms. Margarita Sánchez Campos. Élettani professzor a Granadai Egyetemen. Teresa Nestares Pleguezuelos asszony. A Granadai Egyetem doktora szerződött. TANÚSÍTVÁNY: A kutatási munkák, amelyek a Doktori Tézisjelentésben szerepelnek: A DNS-stabilitás vizsgálata táplálkozási vashiányos vérszegénység esetén. Silvia Mª Hijano Fernández ügyvéd irányításunkkal végezte kecske vagy tehéntej fogyasztásának hatását dúsítva vagy nem vasban. Megállapodásunk szerint a Granadai Egyetem doktori fokozatára törekszik. a Bírósággal, hogy az ő korában nevezzék ki. És megemlítem, hogy a jelenlegi rendelkezéseknek megfelelően Granadában ezt meghosszabbítjuk kétezer-tíz március 17-ig.

Az LDA által bemutatott emlék. SILVIA Mª HIJANO FERNÁNDEZ A GRANADAI EGYETEM DOKTOR FOKJÁNAK MEGÁLLAPÍTÁSÁRA E DOKTORI TÉZISEK AZON KÖZÖTT ALKALMAZOTTAK: Dr.D. Javier Díaz Castro Prof. Dr. Margarita Sánchez Campos Prof. Dr. Teréza Nestares Pleguezuelos Lda. Silvia Mª Hijano Fernández Granada, 2010

KÖSZÖNETNYILVÁNÍTÁS Szeretném kifejezni hálámat mindazoknak az embereknek, akik türelmükkel, támogatásukkal és együttműködésükkel lehetővé tették ezt a kutatómunkát. Különösen igazgatónőmnek, Margarita Sánchez Campos professzornak, aki az első pillanattól kezdve bízott bennem, lehetővé téve számomra, hogy kutatócsoportjában lehessek. Köszönöm elkötelezettségét, szeretetét és érdeklődését a munka minden pillanatában. Igazgatómnak, Dr. Javier Díaz Castro-nak, a kezdetektől fogva közelségéért, technikák tanáromnak, akivel megosztottam a tanulmányban található megállapításokat, köszönöm, hogy nap mint nap ott volt a munka nyomon követésében. és a rendelkezésre állásod érdekében mindig és minden pillanatban, még a távolban is. Igazgatómnak, Teresa Nestares Pleguezuelos professzornak, az első embernek, aki arra biztatott, hogy kezdjem el ezt a nagyszerű kalandot, amely egy doktori disszertáció elkészítésével jár. Köszönöm a bölcs tanácsot. A professzoroknak Inmaculada López Aliaga asszonynak és María José Muñoz Alféreznek személyes vonzalmukért, közelségükért, valamint értékes és nagylelkű segítségükért a munka számos pillanatában. Nagyon könnyű volt veled dolgozni.

Luxus volt részese lenni ennek a projektnek. Büszkeség megosztani veletek ezt a munkát. Magdalena López-Frías professzor úrnak kedvességéért és vonzalmáért. D. Emilio Martínez de Victoria professzornak, a Táplálkozási és Élelmiszer-technológiai Intézet igazgatójának, hogy rendelkezésemre bocsátottam azokat a létesítményeket, ahol a dolgozat kísérleti részét elvégeztem. Az Élettani Tanszék igazgatójának, María López-Jurado Romero de La Cruz professzor úrnak, aki rendelkezésemre bocsátotta az emberi erőforrásokat a dolgozat kidolgozásához. Elisa Alcovernek, az adminisztratív kérdések megoldásában tanúsított kedvességéért. A Mercedes jó barát és nagyszerű munkatársa, néha nagyon el van borulva, és boldoggá teszi ezt a pillanatot. Ön speciális. Köszönöm. Maríának, Mª Ángelesnek, Susanának, Sergio-nak, Pedro-nak és minden kollégámnak a Táplálkozási és Élelmiszer-technológiai Intézetről társulásukért és önzetlen együttműködésükért, és azért, hogy hajlandóak szentelni idejüket, amikor csak szükségem van rá.

Minden barátomnak, akik bár nem kapcsolódnak ehhez a munkához, minden illúziómat megosztják velem. Szüleimnek a törődésükért és aggodalmaikért, a küzdelem és a felelősség példájaként, és olyanná téve, aki vagyok. Antonio, Javier, Jesús és Yolanda testvéreimnek és a családom többi tagjának, akik mindig mellettem voltak, támogattak és bátorítottak. Mauricio unokaöcsémnek, aki társaságával a nyugalom pillanatait adta írás közben. Salvának, a férjemnek, a nagy támogatásért és azért, hogy mindig mellettem van, bár a dolgok néha bonyolultak. A jó és a rossz pillanatok megosztásáért. Szeretlek. Patricia lányomnak, a legcsodálatosabb lánynak, aki intenzíven élte a dolgozat elkészülésének minden pillanatát. Köszönöm a kíváncsiságát, és hogy szinte tőlem is ismeri ezt a tézist.

Patriciának, az életben elért sikereimnek, a tudományban elért sikereimet neked szentelem.

Aki kételkedik és nem nyomoz, nemcsak boldogtalanná válik, hanem igazságtalanná is válik. Blaise pascal.

1. TÁRGY. 1 2. BIBLIOGRÁFIAI HÁTTÉR 2.1. Vas a táplálkozásban. 3 2.1.1. Bevezetés. 3 2.1.2. Vashiány. Táplálkozási vashiányos vérszegénység. 4 2.1.3. A táplálkozási vashiányos vérszegénység klinikai megnyilvánulásai. 7 2.1.4. Ferrodeficiencia kezelése. Orális vas túlterhelés. 11 2.1.5. A vas túlterhelésével kapcsolatos patológiák. 15 2.1.5.1. A vas túlterhelésének okai. 15 2.1.5.2. Örökletes hemochromatosis. 17 2.1.5.3. A vasi toxicitás mechanizmusai. 23 2.1.5.4. A vas túlterhelésének következményei. 24 2.2. Vas funkciók. 28 2.3. Vas ételforrások és biohasznosulás. 32 2.3.1. A vas tápláló felhasználása. 42 2.3.2. Követelmények. 45 2.3.3. A vas bélben történő felszívódása és szállítása. 50 2.3.4. Vaseloszlás a szövetekben és a sejtfelvétel. 54 2.3.5. Vaslerakódások és anyagcsere. 56 2.3.6. Megszüntetés. 59 2.3.7. A vas homeosztázisának mechanizmusa. 60 2.4. A DNS stabilitása és szerkezete. 67 2.4.1. Bevezetés. 67 2.4.2. Történelmi háttér. 68 2.4.3. A DNS fizikai-kémiai tulajdonságai. 70 2.4.4. A genetikai anyag összetevői. 71 2.4.5. Alap párosítás. 75 2.4.6. Egy másik típusú bázispár. 78 2.4.7. DNS-szerkezet. 81.

2.4.8. A genetikai anyag károsodása. 88 2.4.9. A genetikai anyag javítási mechanizmusai. 89 2.4.10. A genetikai anyag stabilitásának meghatározása a Comet alkalikus teszttel. 92 2.5. A kecsketej táplálkozási jellemzői. 99 2.5.1. Bevezetés. 99 2.5.2. Érzékszervi jellemzők. 103 2.5.3. Kecsketej összetétele. 104 2.5.3.1. Kecsketej fehérje. 106 2.5.3.2. Szénhidrátok a kecsketejben. 111 2.5.3.3. Lipidek a kecsketejben. 112 2.5.3.4. Ásványi összetétel. 116 2.5.3.5. A kecsketej vitamin-összetétele. 121 2.5.3.6. Bioaktív tényezők. 123 3. ANYAG ÉS MÓDSZEREK 3.1. Kísérleti terv. 125 3.2. Kipróbált diéták. 128 3.3. Analitikai technikák. 131 3.3.1. Száraz anyag. 131 3.3.2. Zsíros anyag. 131 3.3.3. Fehérjetartalom. 131 3.3.4. Nedves mineralizáció. 131 3.3.4.1. Vas meghatározása. 132 3.3.5. A vörösvértestek száma, a hemoglobin, a hematokrit, az átlagos korpuszkuláris térfogat és a vérlemezkék. 134 3.3.6. Szérum ferritin. 134 3.3.7. Szérumvas, TIBC (teljes vaskötési kapacitás) és transzferrin telítettség. 135 3.3.8. A genetikai anyag stabilitásának meghatározása izolált sejtek gélelektroforézissel (Comet Alkaline Assay). 135

3.3.9. Statisztikai kezelés. 140 4. EREDMÉNYEK ÉS MEGBESZÉLÉS 4.1. Hematológiai paraméterek a PPE-ben. 141 4.2. Testtömeg, májtömeg, hepatosomatikus arány és vaskontroll PPE-ben. 142 4.3. A genetikai anyag stabilitása a PPE-ben. 144 4.4. A máj vaskartalma PE-ben. 148 4.5. A genetikai anyag stabilitása PE-ben. 150 5. ÖSSZEFOGLALÓ ÉS KÖVETKEZTETÉSEK. 163 6. BIBLIOGRÁFIA. 167

tehén- vagy kecsketej alapú, normál tartalmú vagy Fe-túlterhelésű étrendek vizsgálata. A vizsgálat fő célja a Fe-anyagcserével kapcsolatos hematológiai paraméterek tanulmányozása és az izolált sejtek (perifériás vér limfociták) genetikai anyagstabilitásának értékelése kontrollállatok vagy kísérletileg kiváltott táplálkozási vashiányos vérszegénység, mind a patológia megállapítása, mind a gyógyulás során, normál tartalmú vagy krónikus Fe-túlterheléssel rendelkező tehén- vagy kecsketej alapú étrend fogyasztása után.

2. BIBLIOGRÁFIAI HÁTTÉR 2.1. VASÚ TÁPLÁLKOZÁS 2.1.1. BEVEZETÉS A közegészségügy szempontjából messze a hit hiánya a táplálkozási vérszegénység legfőbb oka. A vérszegénység olyan kóros folyamat, amelyben a vörösvértestekben a hemoglobin (Hb) koncentrációja abnormálisan alacsony. Kétségtelen, hogy a vérszegénység túlnyomó többségének oka a Fe-hiány. A Fe-hiány vérszegénységét vagy a táplálkozási vashiányos vérszegénységet (NFA) a Fe lerakódások csökkenése vagy hiánya, alacsony szérum Fe és Hb szint, csökkent hematokrit és megnövekedett vérlemezkeszint jellemzi (Campos et al., 1998), a transzferrin telítettségének alacsony százaléka, a szérum ferritinszintjének csökkenése és a teljes Fe-kötő képesség vagy a teljes vas-kötő képesség (TIBC) drasztikus növekedése. Másrészt a fejlődésre és a növekedésre gyakorolt ​​hatása, a fertőzésekkel szembeni ellenálló képessége és a két évnél fiatalabb gyermekek halálozásával való összefüggése miatt a világ legnagyobb népegészségügyi problémájának és a leggyakoribb táplálkozási hiánynak tekintik. Ezenkívül a Fe-hiány negatív hatással van a gyermekek munkaképességére, valamint a motoros és mentális fejlődésre, 3

DNS-t. A katekolaminok vizeletben történő eliminációja összefügg a hőszabályozás változásával, ezért azokban az esetekben, amikor a Fe-hiány súlyos vérszegénységgel jár, az alanyok testhőmérséklet-csökkenést tapasztalnak. Feltételezték, hogy ebben a folyamatban az alany elveszíti a hőt, és ennek következtében az oxigénfogyasztás és a plazma noradrenalinszint emelkedik (Hillman és Ault, 1995). A Fe-hiány miatti vérszegénységben végzett gyomorbiopszia kimutatta, hogy az esetek 75% -ában a gasztritisz különböző fokú, a gyomorszekréció csökkenésével jár, emellett malabszorpciót figyeltek meg gyermekeknél, felnőtteknél azonban nem. Oski, 1993). A vashiány diagnosztizálására szolgáló laboratóriumi vizsgálatok során általában a következő hematikus rendellenességek jelennek meg: - Hemoglobin: férfiaknál kevesebb, mint 130 g/l, nőknél 120 g/l - Vörös vérsejtek: hipokróm és mikrocita (corpuscularis térfogatú közeg, VCM