többszörös

В
В 		В

Testreszabott szolgáltatások

Magazin

  • SciELO Analytics
  • Google Tudós H5M5 ()

Cikk

  • Spanyol (pdf)
  • Cikk XML-ben
  • Cikk hivatkozások
  • Hogyan lehet idézni ezt a cikket
  • SciELO Analytics
  • Automatikus fordítás
  • Cikk küldése e-mailben

Mutatók

  • Idézi SciELO

Kapcsolódó linkek

  • Hasonló a SciELO-ban

Részvény

Perui Journal of Experimental Medicine and Public Health

nyomtatott változatВ ISSN 1726-4634

Tiszteletes Peru. med. exp. közegészségügy 24. kötet, 2. szám, Lima, 2007. április/június

EREDETI TÉTELEK

PCR-Multiple a Mycoplasma genitalium, Mycoplasma hominis, Ureaplasma parvum és Ureaplasma urealyticum diagnosztizálására

Myltiplex-PCR a Mycoplasma genitalium, Mycoplasma hominis, Ureaplasma parvum és Ureaplasma urealyticum diagnosztizálására

Kulcsszavak: Mycoplasma fertőzések; Ureaplasma fertőzések, polimeráz láncreakció, nem gonococcusos urethritis (forrás: DeCS BIREME).

Kulcsszavak: Mycoplasma fertőzések; Ureaplasma fertőzések; polimeráz láncreakció; Nem gonokokális urethritis (forrás: DeCS BIREME).

BEVEZETÉS

A mikoplazma és az ureaplasma fajok a légzőszervek és az urogenitális traktus különböző betegségeihez társultak, mind nőknél, mind férfiaknál, mind gyermekeknél. A leggyakrabban Mycoplasma hominis, Mycoplasma genitalium, Ureaplasma parvum és Ureaplasma urealyticum fajokat azonosították1.

Ezeket az Mollicutes osztályba tartozó mikroorganizmusokat rendkívül nehéznek tartják in vitro szaporodásuk miatt, mind a szaporodásuk táplálkozási szükségletei miatt, mind a pH, hőmérséklet, ozmotikus nyomás, ultraibolya sugarak, felületaktív anyagok, antitestek és antitestek és komplement, ami megnehezíti a bakteriológiai tenyésztéssel történő izolálást2,3.

ANYAGOK ÉS METÓDUSOK

Referencia DNS-minta

PRIMER SZETTEK A PCR-MÁLTIPLE MÓDSZERHEZ

Az MgPaF-MgPaR primerkészleteket komplementeren alkalmazzák az M. genitalium adhezív fehérje gén (MgPa) egy régiójával, amelyet Jensen és mtsai. 6 ismertettek, a primert az RNS gén 16 bites riboszomális RNS M. hominis és két primerkészlet, amelyek közül az egyik komplementer az U. parvum 16S és 23S riboszomális RNS génjei közötti távtartó régió töredékével, a másik pedig az urázzal szomszédos távtartó régió fragmensével komplementer gén és specifikus az U. urealyticumra, Fernández és munkatársai írták le.7 (1. táblázat).

REAKCIÓKEVERÉK

DNS-ERŐSÍTÉS

A DNS-amplifikációt "Personal MastercyclerR" termikus ciklusban (Eppendorf, Németország) hajtottuk végre, a referencia törzsek DNS-amplifikációjának feltételeit beállítva, 95 ° C-on négy percig programozva, majd 94 ° C-os ciklusokkal 30 másodpercig, három különböző hibridizációs hőmérsékleten tesztelve: 55, 57 és 60 ° C-on 30 másodpercig és 72 ° C-on egy percig, végső meghosszabbítással 72 ° C-on öt percig, 35 és 40 ciklusokkal értékelve.

AZ ERŐSÍTETT TERMÉKEK ELEMZÉSE

KÍNÁLAT KLINIKAI MINTákkal

34 húgycsőváladékot vizsgáltak, amelyek negatívak voltak a Neisseria gonorrheae kimutatására szolgáló tesztekben, ugyanannyi férfibetegtől, akik október és december között részt vettek a katonai kórház mikrobiológiai laboratóriumában "Carlos Juan Finlay". 2005-től.

MINTÁK DNS-KIVONÁSA

PCR-OSZTÁLYÚ MOLLICUTOK

Az egyes klinikai mintákból nyert DNS-t a Mollicutes PCR-specifikus osztályának felhasználásával elemeztük, Fernández és mtsai. 8 szerint. A pozitívak a PCR-multiplexen estek át a vizsgált fajok azonosításához.

PCR-TÖBB A Mycoplasma genitalium, Mycoplasma hominis, Ureaplasma parvum ÉS Ureaplasma urealyticum azonosításához

50 μl végtérfogatú reakcióelegyben a fent leírt négy primer készletet adtuk hozzá. A klinikai minták DNS-ének amplifikálásához a referencia-DNS amplifikálásához használt programot használtuk. Az amplifikált termékeket a fent leírtak szerint elemeztük.

A vizsgált urethralis exudát klinikai mintáinak 79,4% -át (27/34) mutatták ki pozitívnak a Mollicutes esetében a PCR-osztály szerint. Közülük a Multiple-PCR segítségével; 14,8% (4/27) pozitív volt az M. genitaliumra; 18,5% (5/27) M. hominis, míg 11,1% (3/27) U. urealyticum, 3,7% (1/27) U. parvum. A fennmaradó 55,6% (15/27) nem felelt meg egyik vizsgált fajnak sem (2. táblázat). A minták közül kettőt együtt fertőztek, az egyiket M. hominis és U. parvum, a másikat M. hominis és U. urealyticum.

Az urethralis váladék klinikai mintáinak vizsgálata során az M. genitalium pozitivitása egybeesik a többi vizsgálat eredményeivel. Gubelin és mtsai., Amelyeket PCR-rel vizsgáltak, az M. genitalium jelenléte 23, UNG-ben szenvedő férfi urethralis szekréciós mintájában, 13,04% -ban kimutatva ezt a fajt, megtalálva az Ureaplasma spp. a minták 34,7% -ában. Egy Törökországban végzett vizsgálat során 63 urethritis tüneteiben szenvedő beteg vizeletmintáiban vizsgálták a M. genitalium előfordulását, 6,3% -os pozitívumot, valamint U. urealyticum esetében 4,8% -ot, M. hominis esetében pedig 3,2% -ot találtak12.

BIBLIOGRÁFIAI HIVATKOZÁSOK

1. Taylor-Robinson D, Ainsworth JG, McCormack WM. Genitális mikoplazmák. In: Holmes KK, Sparling, PF, Mardh P-A és mtsai. Szexuális úton terjedő betegségek. New York: McGraw-Hill; 2004. o. 533-48. [Linkek]

2. Rivera- Tapia JA, Rodríguez-Preval N. Mycoplasmas és antibiotikumok. Salud Pblica Mex. 2006; 48 (1): 1-2. [Linkek]

3. Stellrecht K, Woron A, Mishrik N, Venezia R. A multiplex PCR assay összehasonlítása tenyészettel a genitális mikoplazmák kimutatására. J Clin Microbiol. 2004; 42 (4): 1528-33. [Linkek]

4. Yoshida T, Maeda S, Deguchi T, MiyazawaT, Ishiko H. A Mycoplasma genitalium, Mycoplasma hominis, Ureaplasma parvum és Ureaplasma urealyticum organizmusok gyors kimutatása genitourináris mintákban PCR- mikrotiter lemezes hibridizációs vizsgálattal. J Clin Microbiol. 2003; 41 (5): 1850-55. [Linkek]

5. Takahashi S, Takeyama K, Miyamoto S, Ichihara K, Maeda T, Kunishima Y és mtsai. A Mycoplasma genitalium, Mycoplasma hominis, Ureaplasma urealyticum és Ureaplasma parvum DNS-ek kimutatása vizeletben tünetmentes, egészséges fiatal japán férfiaktól. J Megfertőzni a Chemoter-t. 2006; 12 (5): 269-71. [Linkek]

6. Jensen JS, Bjornelius E, Dohn B, Lidbrink P. TaqMan 5В ’nukleáz valós idejű PCR-je a Mycoplasma genitalium DNS mennyiségi kimutatására urethritisben szenvedő és urethritis nélküli férfiakban, akik nemi úton terjedő betegség klinikáján vettek részt. J Clinic Microbiol. 2004; 42 (2): 683-92. [Linkek]

9. Svenstrup HF, Jensen JS, Björnelius E, Lidbrink P, Birkelund S, Christiansen G. Kvantitatív reál kifejlesztése ? időbeli PCR-vizsgálat a Mycoplasma genitalium kimutatására. J Clin Microbiol. 2005; 43 (7): 3121-28. [Hivatkozások]

10. Stellrecht K, Woron A, Mishrik N, Venezia R. A multiplex PCR assay összehasonlítása tenyészettel a genitális mikoplazmák kimutatására. J Clin Microbiol. 2004; 42 (4): 1528-33. [Linkek]

12. Dolapci I, Tekeli A, Ozsan M, Yaman O, Ergin S, Elhan A. Mycoplasma genitalium kimutatása Törökországban urethritis tünetekkel küzdő férfi betegeknél polimeráz láncreakcióval. Szaúdi Med J. 2005; 26 (1): 64-68. [Linkek]

13. Keane FE, Thomas BJ, Gilroy CB. A Mycoplasma hominis, az Ureaplasma urealyticum és a Mycoplasma genitalium társulása bakteriális vaginosissal: megfigyelések a heteroszexuális nőkről és férfi partnereikről. Int J STD AIDS. 2000; 11 (6): 356-60. [Linkek]

14. Schlicht MJ, Lovrich SD, Sartin JS, Karpinsky P, Callister SM, Agger WA. A genitális mikoplazmák magas gyakorisága urethritis vagy cervicitis tüneteket mutató szexuálisan aktív fiatal felnőttek körében, La Crosse, Wisconsin. J Clin Microbiol. 2004; 42 (10): 4636-40. [Linkek]

15. Deguchi T, Yoshida T, Miyazawa T, Yasuda M, Tamaki M, Ishiko H és mtsai. Az Ureaplasma urealyticum (Biovar 2) asszociációja nongonococcus urethritissel. Sex Transm Dis. 2004; 31 (3): 192-95. [Linkek]

16. Taylor-Robinson D, Gilroy CB, Keane FE. Számos Mycoplasma faj kimutatása a homoszexuális férfiak különböző anatómiai helyein. Eur J Clin Microbiol Infect Dis. 2003; 22 (5): 291-93. [Linkek]

Levelezés:
Nadia Rodriguez Preval.
Trópusi Orvostudományi Intézet "Pedro KourГ".
Cím: Autopista Novia del MediodГa Km 6, AP 601, Marianao 13. Havanna városa., Kuba.
E-mail: [email protected]

В A folyóirat minden tartalma, kivéve, ha azonosítják, a Creative Commons Licenc alatt áll