A hasnyálmirigy-lipáz enzim aktivitása brojlereknél, amelyek adagjában a Roystonea regia gyümölcs lisztjét fogyasztják. Műszaki megjegyzés

aktivitása

2 Állattudományi Intézet, PO Box 24, San José de las Lajas, Mayabeque, Kuba

40 hím brojler felhasználásával meghatároztuk a hasnyálmirigy-lipáz enzim aktivitását azokból a brojlerekből, amelyek adagban Roystonea regia gyümölcslisztet (pálmaliszt) fogyasztottak. Teljesen randomizált mintát alkalmaztunk négy kezeléssel, amelyek 0, 5, 10 és 15% -os pálmaliszt helyettesítéséből álltak. 42 d-nél feláldoztuk őket a hasnyálmirigy előállításához, és meghatároztuk a hasnyálmirigy-lipáz enzimatikus aktivitását. Az étrend hatása ebben a mutatóban volt megfigyelhető, amely nagyobb volt a pálmalisztet fogyasztó csirkéknél, mint a kontroll étrendben (1983 vs. 2500, 2566, illetve 3283 ml NaOH/perc/mg fehérje) (P Oliva et al. 2018). Olaj-, laurinsav-, palmitinsav- és linolsavak vannak túlsúlyban, amelyek 8 és 18 szénatomot tartalmaznak, amelyek elsősorban energiaforrás-státuszáért felelősek. A Palmiche az egyik legfontosabb alternatív energiájú élelmiszer, amely Kubában kapható, ahol a sertések nem konvencionális táplálékforrásaként népszerű (Ly et al. 2017), de a madarak esetében konkrét eredmények nélkül.

Magas lipidforrásként, amely a madarak gyomor-bél traktusában emészthető meg, a pálmamagnak lipolitikus enzimekre van szüksége. Közülük a hasnyálmirigy-lipáz az egyik legjobban tanulmányozott. Ez az enzim felhasználható markerként a frakció emésztéséhez. Ezért ennek a vizsgálatnak a célja a hasnyálmirigy-lipáz enzimatikus aktivitásának meghatározása volt olyan brojlereknél, amelyek adagban Roystonea regia gyümölcslisztet fogyasztanak.

Negyvennyolc napos hím brojlereket (HE21) használtak fémketrecekben. Az állatokat 8 naptól 42 napig kísérleti tápláléknak vetettük alá, amelyeket az NRC (1994) által e madárkategóriára vonatkozóan előírt követelményeknek megfelelően állítottunk össze. A kontroll egy hagyományos szója-kukorica diétából állt. A másik három kezelésben 5, 10 és 15% pálmalisztet tartalmaztak, így az izoprotein és az izoenergetikus étrendet a kezdeti, a növekedési és a befejezési időszakban fenntartották. A kísérlet teljes ideje alatt a csirkék szabadon hozzáférhettek vízhez és élelemhez.

A natura pálmafát a Mayabeque tartományból nyerték. A szárítási eljárás abból állt, hogy a pálmamagot kézzel leválasztották, majd öt egymást követő napon keresztül napsugárzásnak tették ki, szárítótányérra terítve.

A száraz anyagot zsákokban, zárt térben, megfelelő szellőzésű és alacsony páratartalmú raktárakban tárolták. Öt naponként őrölték a gabonafélék és gabonafélék étrendjének többi összetevőjével a megfelelő arányban, azzal a céllal, hogy meghosszabbítsák a pálmaliszt hasznos élettartamát, amely gyorsan avasodik, és csökkenti annak biológiai minőségét és ízét ( Oliva et al., 2018).

A kísérlet 42 d-jén tíz csirkét lemértek és levágtak kezelésenként, a nyaki vénák vérzésének módszere szerint. Ehhez pontosan két órával és harminc perccel azután, hogy az állatok elfogyasztották az ételt, követték a hagyományos eljárásokat (kábítás, vérzés és kibelezés) annak érdekében, hogy mintákat vegyenek a hasnyálmirigyből és megkapják a hasnyálmirigy homogenátumát. Azonnal minden csirkéből eltávolítottuk a hasnyálmirigyet, és 4 ml/g fiziológiás sóoldatba merítettük 0–4 ° C között, hogy a laboratóriumba vigyük őket. Három állat szerveit manuálisan homogenizálták. 5000 fordulat/perc sebességgel centrifugáltuk. 10 percig 4 ° C-on, hőtudományi IEC CL31R márkájú hűtött centrifugában. A pelletet eldobtuk, és a felülúszót kis alikvotokban -80 ° C-on tároltuk.

A fehérjekoncentrációt Bradford (1976) módszerével határoztuk meg Rigol UV-vis spektrofotométeren, Ultra-3400 sorozaton. A koncentrációk kiszámítását a minták abszorbanciaértékeinek interpolálásával végeztük a szarvasmarha szérumalbumin (BSA) standard görbéjében (0,01-5 mg/ml). Ezt az összes vizsgált homogenizátum esetében 3 mg/ml koncentrációban standardizálták, amelyhez minden esetben elvégezték a megfelelő hígításokat. Az összes elemzést három példányban hajtottuk végre.

Az enzimaktivitás maximális megbízhatóságának elérése érdekében az enzim javasolt lineáris tartományát használtuk, amelyhez öt perc inkubációs időt alkalmaztunk (León és mtsai 2014). A lipáz aktivitást Tietz és Fiereck (1966) által javasolt módszerrel határoztuk meg. Meghatároztuk a szükséges térfogatú NaOH-t (50 mM) a felszabaduló zsírsavak semlegesítéséhez enzimatikus lebontás után. A rendszert mérsékelt keverés közben 37 ° C-on tartottuk, és 3 ml olívaolajat használtunk szubsztrátként. Az enzim aktivitását ml NaOH/perc/mg fehérje értékben fejeztük ki.

Az eredmények statisztikai elemzéséhez egy teljesen randomizált tervet használtunk, négy kezeléssel és három ismétléssel (egyenként három hasnyálmirigy). Az átlagok közötti különbségeket szükség esetén Duncan (1955) szerint határozták meg. Az alkalmazott statisztikai csomag az Infostat volt (Di Rienzo et al. 2012).

Jelentős hatást figyeltek meg a pálmaliszt étrendbe történő felvételével, különösen a hasnyálmirigy lipáz enzim aktivitásának a brojlereknél (1. ábra). A pálmaliszt 15% -át tartalmazó kezelés jelentősen megnövelte az enzim aktivitását a többi kezeléshez képest. Az 5 és 10% -os kezelések nem különböztek egymástól. A kontroll volt az a kezelés, amely a legkevesebb aktivitást mutatta (P Barberá 2016).

1. ábra A hasnyálmirigy lipáz enzimatikus aktivitása brojlerekben, amelyek különböző szintű királyi pálmadiólisztet fogyasztanak

Gonçalves et al. (2010) táplálkozási tényezői, például a másodlagos metabolitok, szintén módosíthatják a hasnyálmirigy lipáz aktivitását. Ezek a szerzők kijelentették, hogy a nagy molekulatömegű polimer flavonoidok hiánya, amelyeket a hasnyálmirigy lipáz aktivitásának gátlásának tulajdonítottak, az enzimmel specifikus kölcsönhatás révén, általában az intenzív színű gyümölcsökben, például a szőlőben. Noha a pálmafa termése feketésbarna színű, a gyümölcsliszten végzett kvalitatív fitokémiai szűrés során kizárták a másodlagos metabolitok jelenlétét (Ly és mtsai. 2017), ami megmagyarázná az eredményt. kapott.

Barberá (2016) bebizonyította, hogy az étrend összetételének megváltozása, különféle lipid- és zsírsavforrások bevonásával, módosulásokat okozhat a lipáz enzim aktivitásában. Bár fontos figyelembe venni, hogy a hasnyálmirigy-szekréció reagál egy élelmiszer-ingerre, ezen enzimek aktivitása, ha bejutnak a bél nyálkahártyájába, szintén hatással lehetnek a brojlercsirkéknél (León és mtsai 2014), amint ez a tanulmány megfigyelhető.

A hasnyálmirigy-lipáz fokozott aktivitása fokozhatja a lipidek emésztését, ami előnyös lehet az állat számára, mivel ismert, hogy ezek a biomolekulák számos fontos biológiai funkciót töltenek be a szervezetben. Közülük meg lehet említeni, hogy a membránok szerkezeti alkotóelemeit, valamint a katabolikus üzemanyag szállítási és tárolási formáit alkotják. Védő burkolatként is működnek a sejt felszínén, ami összefügg a sejt-sejt felismeréssel, a fajspecifitással és a szöveti immunitással. Intenzív biológiai aktivitással is rendelkeznek, mivel néhány vitamin (A, B, D, E és K) és hormonok közöttük vannak.

Arra a következtetésre jutottak, hogy a pálma gyümölcsliszt felvétele a brojlerek étrendjébe növeli a hasnyálmirigy lipáz enzim aktivitását, ami lehetővé teszi a lipidek emésztését a gyomor-bél traktusban.

Barberá, A. 2016. A mátrix és a zsír típusának hatása egyes halászati ​​termékek lipidjeinek és fehérjeinek emészthetőségére. PhD értekezés. Escola Tècnica Superior d’Enginyeria Agronòmica i del Medi Natural, València Politechnikai Egyetem, València, Spanyolország. o. 42 [Linkek]

Bradford, M.M. 1976. „Gyors és érzékeny módszer mikrogramm mennyiségű fehérje mennyiségének meghatározására, a fehérje-festék megkötésének elvét alkalmazva”. Analitical Biochemistry, 72 (1-2): 248-254, ISSN: 0003-2697, DOI: 10.1016/0003-2697 (76) 90527-3 [Linkek]

Di Rienzo, J. A., Casanoves, F., Balzarini, M. G., González, L., Tablada, M. & Robledo, C. W. 2012. InfoStat. verzió 2012, [Windows], National University of Córdoba, Argentina: Grupo InfoStat. Elérhető: http://www.infostat.com.ar [Linkek]

Duncan, D.B. 1955. "Több tartományú és többszörös F tesztek". Biometria, 11 (1): 1-42, ISSN: 0006341X, DOI: 10.2307/3001478 [Linkek]

Goncalves, R., Mateus, N. & De Freitas, V. 2010. „A hasnyálmirigy-lipáz és a procianidinek kölcsönhatásának vizsgálata optikai és enzimatikus módszerekkel”. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 58 (22): 11901-11906, ISSN: 0021- 8561, DOI: 10.1021/jf103026x [Linkek]

León, M. V, Colina, J. J., Rico, D., Araque, H., Rossini, M., Castañeda, M.V & de Arvelo, E.E.R. 2014. "A hasnyálmirigy-tripszin és a lipáz enzimek aktivitása pijiguao liszttel (Bactris gasipaes HBK) és szintetikus lizinnel táplált sertéseknél". Az Állatorvos-tudományi Kar folyóirata, UCV, 55 (1): 11-17, ISSN: 0258-6576 [Linkek]

Ly, J., Ayala, L. & Delgado, E.J. 2017. "A sertések tenyérértéke és az azt befolyásoló tényezők". Állattenyésztési kutatás a vidékfejlesztéshez, 29. cikk (4), elérhető: https://www.lrrd.cipav.org.co/lrrd29/4/ly29064.html [Linkek]

N.R.C. (Nemzeti Kutatási Tanács). 1994. A baromfi tápanyagigénye. 9. felülvizsgált kiadás. Ed. National Academies Press, Washington DC, USA. o. 176, ISBN: 0309048923 [Linkek]

Oliva, D., Martínez, M., Jiménez, L. & Ly, J. 2018. „A királyi pálmadió-liszt diétájával táplált növekvő sertések teljesítményjellemzői”. Cuban Journal of Agricultural Science, 52 (2): 1-8, ISSN: 2079-3480. [Linkek]

Tietz, N.W. & Fiereck, E.A. 1966. "Specifikus módszer a szérum lipáz meghatározására". Clinica Chimica Acta, 13 (3): 352-358, ISSN: 0009-8981, DOI: 10.1016/0009-8981 (66) 90215-4. [Linkek]

Beérkezett: 2019. július 29 .; Jóváhagyva: 2020. január 08